寄生虫与医学昆虫学报
寄生蟲與醫學昆蟲學報
기생충여의학곤충학보
ACTA PARASITOLOGICA ET MEDICA ENTOMOLOGICA SINICA
2009年
4期
193-197
,共5页
顾园%魏骏飞%李洁%崔世娟%赵夕%诸欣平
顧園%魏駿飛%李潔%崔世娟%趙夕%諸訢平
고완%위준비%리길%최세연%조석%제흔평
旋毛虫%单克隆抗体%生物淘洗%噬菌体展示肽库%抗原表位
鏇毛蟲%單剋隆抗體%生物淘洗%噬菌體展示肽庫%抗原錶位
선모충%단극륭항체%생물도세%서균체전시태고%항원표위
以抗旋毛虫Ts87蛋白单克隆抗体2A2作为靶标,对噬菌体展示随机十二肽库进行筛选.通过ELISA鉴定筛选克隆的结合特性,并对阳性克隆提取DNA进行测序分析.结果显示,经3轮生物淘洗后,目标噬菌体得到433倍富集.随机挑选20个克隆进行ELISA鉴定,其中有18个噬菌体克隆可以与单抗2A2特异性结合.测序分析发现,这18个克隆带有4种氨基酸序列,分别为:TPHPHIFYREAS、DWKAWTQMLDSY、WQIEYFrLHSLW和VSPHEYWSEL.经比对未发现这4种序列与Ts87蛋白序列有明显同源性.将这4株噬菌体克隆扩增后,经Western-blot鉴定均可被单抗2A2识别.结果表明本次筛选鉴定得到的4个噬菌体展示肽可能是旋毛虫 Ts87蛋白的模拟抗原表位.
以抗鏇毛蟲Ts87蛋白單剋隆抗體2A2作為靶標,對噬菌體展示隨機十二肽庫進行篩選.通過ELISA鑒定篩選剋隆的結閤特性,併對暘性剋隆提取DNA進行測序分析.結果顯示,經3輪生物淘洗後,目標噬菌體得到433倍富集.隨機挑選20箇剋隆進行ELISA鑒定,其中有18箇噬菌體剋隆可以與單抗2A2特異性結閤.測序分析髮現,這18箇剋隆帶有4種氨基痠序列,分彆為:TPHPHIFYREAS、DWKAWTQMLDSY、WQIEYFrLHSLW和VSPHEYWSEL.經比對未髮現這4種序列與Ts87蛋白序列有明顯同源性.將這4株噬菌體剋隆擴增後,經Western-blot鑒定均可被單抗2A2識彆.結果錶明本次篩選鑒定得到的4箇噬菌體展示肽可能是鏇毛蟲 Ts87蛋白的模擬抗原錶位.
이항선모충Ts87단백단극륭항체2A2작위파표,대서균체전시수궤십이태고진행사선.통과ELISA감정사선극륭적결합특성,병대양성극륭제취DNA진행측서분석.결과현시,경3륜생물도세후,목표서균체득도433배부집.수궤도선20개극륭진행ELISA감정,기중유18개서균체극륭가이여단항2A2특이성결합.측서분석발현,저18개극륭대유4충안기산서렬,분별위:TPHPHIFYREAS、DWKAWTQMLDSY、WQIEYFrLHSLW화VSPHEYWSEL.경비대미발현저4충서렬여Ts87단백서렬유명현동원성.장저4주서균체극륭확증후,경Western-blot감정균가피단항2A2식별.결과표명본차사선감정득도적4개서균체전시태가능시선모충 Ts87단백적모의항원표위.
