CAJ | 학술논문

应用同源克隆和RACE技术克隆了军曹鱼(Rachycentron canadium Linnaeus)Igκ轻链的cDNA全序列,并分析其在组织中的表达.军曹鱼Igκ的cDNA全长969 bp,3'端的非编码区域(UTR)为188 bp,5'UTR为52 bp,开放阅读框为729 bp,编码242个氨基酸,分子量约为26.255 kD,理论等电点7.52.推测的军曹鱼Igκ恒定区氨基酸序列同鰤(Seriola quinqueradiata)、大西洋鲑(Salmo salar)的Ig轻链同源性最高,达77%以上,可变区氨基酸序列与鰤的相应序列同源性最高,达87%.通过构建系统进化树可以看出,军曹鱼Igκ恒定区氨基酸序列同鰤、大西洋鲑的L3、斑点叉尾鲴(Ictalurus punctatus)的G等鱼的轻链均为κ型的聚为一支,同大西洋鲑的L2、斑马鱼(Danio rerios)的L2、鲤(Cyprinus carpio)的L2等均为λ型的明显不同,由此可推断此序列属于Igκ型.利用半定量PCR技术,发现在健康鱼体中κ链基因在肝脏和鳃中的表达量较高,在肠和脑组织中几乎没有表达.经鲨鱼弧菌(Vibrio carchariae)JT2刺激192 h后,κ链基因在采样的各个组织中均有表达,尤其在头肾、肠、鳃和脾中的表达量较正常水平明显升高,而肝的表达量有所下降,脑组织有κ链基因的少量表达.说明经刺激后头肾、脾脏、肠、鳃是免疫球蛋白的主要表达场所,在抵御病原感染过程中发挥着重要作用.
응용동원극륭화RACE기술극륭료군조어(Rachycentron canadium Linnaeus)Igκ경련적cDNA전서렬,병분석기재조직중적표체.군조어Igκ적cDNA전장969 bp,3'단적비편마구역(UTR)위188 bp,5'UTR위52 bp,개방열독광위729 bp,편마242개안기산,분자량약위26.255 kD,이론등전점7.52.추측적군조어Igκ항정구안기산서렬동사(Seriola quinqueradiata)、대서양해(Salmo salar)적Ig경련동원성최고,체77%이상,가변구안기산서렬여사적상응서렬동원성최고,체87%.통과구건계통진화수가이간출,군조어Igκ항정구안기산서렬동사、대서양해적L3、반점차미고(Ictalurus punctatus)적G등어적경련균위κ형적취위일지,동대서양해적L2、반마어(Danio rerios)적L2、리(Cyprinus carpio)적L2등균위λ형적명현불동,유차가추단차서렬속우Igκ형.이용반정량PCR기술,발현재건강어체중κ련기인재간장화새중적표체량교고,재장화뇌조직중궤호몰유표체.경사어호균(Vibrio carchariae)JT2자격192 h후,κ련기인재채양적각개조직중균유표체,우기재두신、장、새화비중적표체량교정상수평명현승고,이간적표체량유소하강,뇌조직유κ련기인적소량표체.설명경자격후두신、비장、장、새시면역구단백적주요표체장소,재저어병원감염과정중발휘착중요작용.