复旦学报(自然科学版)
複旦學報(自然科學版)
복단학보(자연과학판)
JOURNAL OF FUDAN UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE)
2003年
4期
532-535,540
,共5页
刘旭%崔秀璟%罗轶英%焦达%邓可京%乔守怡
劉旭%崔秀璟%囉軼英%焦達%鄧可京%喬守怡
류욱%최수경%라질영%초체%산가경%교수이
MCP基因%DAF基因%融合蛋白
MCP基因%DAF基因%融閤蛋白
MCP기인%DAF기인%융합단백
人膜辅基蛋白MCP(membrane cofactor protein)和降解加速因子DAF(decay-accelerating factor)是免疫排斥反应中补体系统活性调节的重要蛋白. 以PCR的方法分别从成人肝cDNA文库和胎儿骨髓cDNA文库中扩增得到MCP和DAF基因,克隆入载体pUC19,再以所构建质粒为模板,以PCR的方式在二基因间加入编码柔性连接肽的DNA序列,构建融合基因MCP-DAF,并克隆入pUC19质粒. 将MCP、DAF及MCP-DAF亚克隆至大肠杆菌表达载体pET-32a(+)或pET-32b(+),构建表达载体MCP-pET32a,DAF-pET32b及MCP-DAF-pET32a,分别导入E.coli BL21菌株中表达,得到预期分子质量大小的蛋白.
人膜輔基蛋白MCP(membrane cofactor protein)和降解加速因子DAF(decay-accelerating factor)是免疫排斥反應中補體繫統活性調節的重要蛋白. 以PCR的方法分彆從成人肝cDNA文庫和胎兒骨髓cDNA文庫中擴增得到MCP和DAF基因,剋隆入載體pUC19,再以所構建質粒為模闆,以PCR的方式在二基因間加入編碼柔性連接肽的DNA序列,構建融閤基因MCP-DAF,併剋隆入pUC19質粒. 將MCP、DAF及MCP-DAF亞剋隆至大腸桿菌錶達載體pET-32a(+)或pET-32b(+),構建錶達載體MCP-pET32a,DAF-pET32b及MCP-DAF-pET32a,分彆導入E.coli BL21菌株中錶達,得到預期分子質量大小的蛋白.
인막보기단백MCP(membrane cofactor protein)화강해가속인자DAF(decay-accelerating factor)시면역배척반응중보체계통활성조절적중요단백. 이PCR적방법분별종성인간cDNA문고화태인골수cDNA문고중확증득도MCP화DAF기인,극륭입재체pUC19,재이소구건질립위모판,이PCR적방식재이기인간가입편마유성련접태적DNA서렬,구건융합기인MCP-DAF,병극륭입pUC19질립. 장MCP、DAF급MCP-DAF아극륭지대장간균표체재체pET-32a(+)혹pET-32b(+),구건표체재체MCP-pET32a,DAF-pET32b급MCP-DAF-pET32a,분별도입E.coli BL21균주중표체,득도예기분자질량대소적단백.
