中国农业科学
中國農業科學
중국농업과학
SCIENTIA AGRICULTURA SINICA
2003年
10期
1213-1218
,共6页
严琳%何启盖%陈焕春%肖少波%吴美洲%吕建强%韩丽
嚴琳%何啟蓋%陳煥春%肖少波%吳美洲%呂建彊%韓麗
엄림%하계개%진환춘%초소파%오미주%려건강%한려
猪白细胞介素2%猪白细胞介素6%表达%伪狂犬病鄂A株基因缺失疫苗%佐剂
豬白細胞介素2%豬白細胞介素6%錶達%偽狂犬病鄂A株基因缺失疫苗%佐劑
저백세포개소2%저백세포개소6%표체%위광견병악A주기인결실역묘%좌제
将猪白细胞介素2(pIL-2)与猪白细胞介素6(pIL-6)的cDNA序列克隆到大肠杆菌表达载体pET-28a及pGEX-KG上,转化BL21(DE3)表达菌,经IPTG诱导产生重组蛋白pIL-2与pIL-6,表达量分别占菌株总蛋白的43.45%和28.37%,经提纯后含量可分别达到97.06%和86.37%.将提纯后不同剂量的两种重组蛋白以单独或组合的方式,加入伪狂犬病(Ea株)TK-/gG-双基因缺失疫苗中,使每头份疫苗分别含2、5和10 μg·ml-1的pIL-2或(和)pIL-6,用此疫苗免疫伪狂犬病抗体阴性猪.同时设试验对照组.初次免疫30 d后加强免疫,测定中和抗体,观察试验猪的日增重情况,进行统计分析.发现各试验组的抗体水平均高于不含重组蛋白的基因缺失疫苗组;其中,含2 μg·ml-1 pIL-2试验组与含10 μg·ml-1 pIL-2/pIL-6试验组抗体水平和基因缺失疫苗对照组之间呈显著差异(P=0.019)与极显著差异(P=0.009).结果表明,大肠杆菌表达的pIL-2、pIL-6对伪狂犬病鄂A株基因缺失疫苗(TK-/gG-/LacZ+)有较强的佐剂效应,且呈剂量相关性.不同试验组日增重比较结果表明,免疫效果高低与猪的生长速度呈正相关.本试验为重组pIL-2与pIL-6作为新型疫苗佐剂应用提供了重要的试验依据.
將豬白細胞介素2(pIL-2)與豬白細胞介素6(pIL-6)的cDNA序列剋隆到大腸桿菌錶達載體pET-28a及pGEX-KG上,轉化BL21(DE3)錶達菌,經IPTG誘導產生重組蛋白pIL-2與pIL-6,錶達量分彆佔菌株總蛋白的43.45%和28.37%,經提純後含量可分彆達到97.06%和86.37%.將提純後不同劑量的兩種重組蛋白以單獨或組閤的方式,加入偽狂犬病(Ea株)TK-/gG-雙基因缺失疫苗中,使每頭份疫苗分彆含2、5和10 μg·ml-1的pIL-2或(和)pIL-6,用此疫苗免疫偽狂犬病抗體陰性豬.同時設試驗對照組.初次免疫30 d後加彊免疫,測定中和抗體,觀察試驗豬的日增重情況,進行統計分析.髮現各試驗組的抗體水平均高于不含重組蛋白的基因缺失疫苗組;其中,含2 μg·ml-1 pIL-2試驗組與含10 μg·ml-1 pIL-2/pIL-6試驗組抗體水平和基因缺失疫苗對照組之間呈顯著差異(P=0.019)與極顯著差異(P=0.009).結果錶明,大腸桿菌錶達的pIL-2、pIL-6對偽狂犬病鄂A株基因缺失疫苗(TK-/gG-/LacZ+)有較彊的佐劑效應,且呈劑量相關性.不同試驗組日增重比較結果錶明,免疫效果高低與豬的生長速度呈正相關.本試驗為重組pIL-2與pIL-6作為新型疫苗佐劑應用提供瞭重要的試驗依據.
장저백세포개소2(pIL-2)여저백세포개소6(pIL-6)적cDNA서렬극륭도대장간균표체재체pET-28a급pGEX-KG상,전화BL21(DE3)표체균,경IPTG유도산생중조단백pIL-2여pIL-6,표체량분별점균주총단백적43.45%화28.37%,경제순후함량가분별체도97.06%화86.37%.장제순후불동제량적량충중조단백이단독혹조합적방식,가입위광견병(Ea주)TK-/gG-쌍기인결실역묘중,사매두빈역묘분별함2、5화10 μg·ml-1적pIL-2혹(화)pIL-6,용차역묘면역위광견병항체음성저.동시설시험대조조.초차면역30 d후가강면역,측정중화항체,관찰시험저적일증중정황,진행통계분석.발현각시험조적항체수평균고우불함중조단백적기인결실역묘조;기중,함2 μg·ml-1 pIL-2시험조여함10 μg·ml-1 pIL-2/pIL-6시험조항체수평화기인결실역묘대조조지간정현저차이(P=0.019)여겁현저차이(P=0.009).결과표명,대장간균표체적pIL-2、pIL-6대위광견병악A주기인결실역묘(TK-/gG-/LacZ+)유교강적좌제효응,차정제량상관성.불동시험조일증중비교결과표명,면역효과고저여저적생장속도정정상관.본시험위중조pIL-2여pIL-6작위신형역묘좌제응용제공료중요적시험의거.
