中国生物制品学杂志
中國生物製品學雜誌
중국생물제품학잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
2004年
1期
4-7
,共4页
花群义%徐自忠%金宁一%杨云庆%董俊%杨晶焰%周晓黎
花群義%徐自忠%金寧一%楊雲慶%董俊%楊晶燄%週曉黎
화군의%서자충%금저일%양운경%동준%양정염%주효려
水泡性口炎病毒%核蛋白基因%克隆%序列分析
水泡性口炎病毒%覈蛋白基因%剋隆%序列分析
수포성구염병독%핵단백기인%극륭%서렬분석
目的对水泡性口炎病毒编码群特异性抗原的N基因进行PCR扩增、克隆和序列分析.方法将水泡性口炎病毒编码群特异性抗原的N基因片段克隆至pMD18-T载体中,构建N基因重组质粒载体.进行PCR及限制性内切酶分析,筛选获得N基因插入的阳性克隆.经核苷酸序列分析,并与Genbank中的VSV编码核衣壳蛋白N基因序列进行比较.结果该序列与VSV New Jersey型的09/82-HD-B株同源性最高,核苷酸和推测氨基酸的同源性分别为98.9%和98.8%,有13个核苷酸差异,伴有5个氨基酸改变,第72位的酪氨酸变为组氨酸,第89位的缬氨酸变为异亮氨酸,第183位的天冬氨酸变为天冬酰胺,第205位的苯丙氨酸变为亮氨酸,第418位的丙氨酸变为缬氨酸;与Indiana型各株的同源性较低,与Glasgow株相比,核苷酸和氨基酸的同源性分别为67.9%和716%.结论已成功地克隆了水泡性口炎病毒N基因,为水泡性口炎免疫血清学诊断试剂的制备和分子生物学研究打下了坚实基础.
目的對水泡性口炎病毒編碼群特異性抗原的N基因進行PCR擴增、剋隆和序列分析.方法將水泡性口炎病毒編碼群特異性抗原的N基因片段剋隆至pMD18-T載體中,構建N基因重組質粒載體.進行PCR及限製性內切酶分析,篩選穫得N基因插入的暘性剋隆.經覈苷痠序列分析,併與Genbank中的VSV編碼覈衣殼蛋白N基因序列進行比較.結果該序列與VSV New Jersey型的09/82-HD-B株同源性最高,覈苷痠和推測氨基痠的同源性分彆為98.9%和98.8%,有13箇覈苷痠差異,伴有5箇氨基痠改變,第72位的酪氨痠變為組氨痠,第89位的纈氨痠變為異亮氨痠,第183位的天鼕氨痠變為天鼕酰胺,第205位的苯丙氨痠變為亮氨痠,第418位的丙氨痠變為纈氨痠;與Indiana型各株的同源性較低,與Glasgow株相比,覈苷痠和氨基痠的同源性分彆為67.9%和716%.結論已成功地剋隆瞭水泡性口炎病毒N基因,為水泡性口炎免疫血清學診斷試劑的製備和分子生物學研究打下瞭堅實基礎.
목적대수포성구염병독편마군특이성항원적N기인진행PCR확증、극륭화서렬분석.방법장수포성구염병독편마군특이성항원적N기인편단극륭지pMD18-T재체중,구건N기인중조질립재체.진행PCR급한제성내절매분석,사선획득N기인삽입적양성극륭.경핵감산서렬분석,병여Genbank중적VSV편마핵의각단백N기인서렬진행비교.결과해서렬여VSV New Jersey형적09/82-HD-B주동원성최고,핵감산화추측안기산적동원성분별위98.9%화98.8%,유13개핵감산차이,반유5개안기산개변,제72위적락안산변위조안산,제89위적힐안산변위이량안산,제183위적천동안산변위천동선알,제205위적분병안산변위량안산,제418위적병안산변위힐안산;여Indiana형각주적동원성교저,여Glasgow주상비,핵감산화안기산적동원성분별위67.9%화716%.결론이성공지극륭료수포성구염병독N기인,위수포성구염면역혈청학진단시제적제비화분자생물학연구타하료견실기출.
