CAJ | 학술논문

Protein A和protein L是细菌产生的两种结构和功能均不同的免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)结合分子,在细菌的致病中起重要作用.用含Sac Ⅰ位点的特定引物PCR分别扩增制备protein A的A、B、C、D抗体结合结构域和protein L的B3抗体结合结构域,各结构域DNA片段经Sac Ⅰ酶切后,再随机连接形成各种不同长度的分子组合文库,将该文库呈现在噬菌体表面构建了噬菌体展示Ig结合分子单结构域随机组合文库,所建组合文库容量为2.3×106个菌落形成单位,滴度为4.1×1011 TU/ml,包含各种单结构域片段,并以随机方式连接.用人Ig对该文库进行4轮亲和筛选,随机挑选36个代表性的阳性克隆进行序列测定分析表明,亲和筛选获得了多种非天然形式存在的新的Ig结合分子结构,其中32个克隆具有由protein L的单结构域和protein A的单结构域间隔重复排列而成的特征性(MDPL-MDPA)n结构.对噬菌体展示Ig结合分子单结构域随机组合文库的体外分子进化研究的尝试,为Ig结合分子的结构和功能研究提供了一新的途径,也为Ig结合分子的定向改造打下基础.
Protein A화protein L시세균산생적량충결구화공능균불동적면역구단백(immunoglobulin,Ig)결합분자,재세균적치병중기중요작용.용함Sac Ⅰ위점적특정인물PCR분별확증제비protein A적A、B、C、D항체결합결구역화protein L적B3항체결합결구역,각결구역DNA편단경Sac Ⅰ매절후,재수궤련접형성각충불동장도적분자조합문고,장해문고정현재서균체표면구건료서균체전시Ig결합분자단결구역수궤조합문고,소건조합문고용량위2.3×106개균락형성단위,적도위4.1×1011 TU/ml,포함각충단결구역편단,병이수궤방식련접.용인Ig대해문고진행4륜친화사선,수궤도선36개대표성적양성극륭진행서렬측정분석표명,친화사선획득료다충비천연형식존재적신적Ig결합분자결구,기중32개극륭구유유protein L적단결구역화protein A적단결구역간격중복배렬이성적특정성(MDPL-MDPA)n결구.대서균체전시Ig결합분자단결구역수궤조합문고적체외분자진화연구적상시,위Ig결합분자적결구화공능연구제공료일신적도경,야위Ig결합분자적정향개조타하기출.