黑龙江畜牧兽医
黑龍江畜牧獸醫
흑룡강축목수의
HEILONGJIANG JOURNAL OF ANIMAL SCIENCE AND VETERINARY MEDICINE
2008年
4期
11-13
,共3页
小白鼠%乳腺上皮细胞%细胞形态
小白鼠%乳腺上皮細胞%細胞形態
소백서%유선상피세포%세포형태
以无菌手术法取健康妊娠期、泌乳期昆明小白鼠的乳腺组织,用胰蛋白酶、胶原酶I分段消化法获得小鼠乳腺细胞.生长培养液为DMEM/F12,含10%胎牛血清,添加胰岛素(5 ug/mL)、EGF(5 ng/mL)、氢化可的松(1 ug/mL)、青霉素(200 IU/mL)及链霉素(O.1 mg/mL).从乳腺组织中获得的细胞直接放入-80 c冰箱中进行冻存,冻存液为DMEM/F12,含20%胎牛血清、10%DMSO.用倒置显微镜观察细胞形态,发现乳腺组织消化后即可获得呈圆饼状的上皮细胞;培养过程中,乳腺上皮细胞的形态以鹅卵石型和多角型为主,增殖可形成乳头状结构,称之为乳球体,大量增殖后形成圆顶型结构.细胞核呈圆形或椭圆形,在传代过程中,乳腺上皮细胞可形成岛屿状的闭合型细胞群,边界清晰,细胞之间结合紧密,细胞间呈拉网结构.结果表明:获得典型上皮细胞形态的小鼠乳腺细胞原代培养物,从泌乳期小鼠获得的乳腺上皮细胞传至第1代时无法长成单层;而从妊娠期小鼠获得的乳腺上皮细胞传至第3代时才无法长成单层;冻存后复苏的乳腺细胞在培养过程中仍然具有典型的上皮细胞形态,并且增殖旺盛.
以無菌手術法取健康妊娠期、泌乳期昆明小白鼠的乳腺組織,用胰蛋白酶、膠原酶I分段消化法穫得小鼠乳腺細胞.生長培養液為DMEM/F12,含10%胎牛血清,添加胰島素(5 ug/mL)、EGF(5 ng/mL)、氫化可的鬆(1 ug/mL)、青黴素(200 IU/mL)及鏈黴素(O.1 mg/mL).從乳腺組織中穫得的細胞直接放入-80 c冰箱中進行凍存,凍存液為DMEM/F12,含20%胎牛血清、10%DMSO.用倒置顯微鏡觀察細胞形態,髮現乳腺組織消化後即可穫得呈圓餅狀的上皮細胞;培養過程中,乳腺上皮細胞的形態以鵝卵石型和多角型為主,增殖可形成乳頭狀結構,稱之為乳毬體,大量增殖後形成圓頂型結構.細胞覈呈圓形或橢圓形,在傳代過程中,乳腺上皮細胞可形成島嶼狀的閉閤型細胞群,邊界清晰,細胞之間結閤緊密,細胞間呈拉網結構.結果錶明:穫得典型上皮細胞形態的小鼠乳腺細胞原代培養物,從泌乳期小鼠穫得的乳腺上皮細胞傳至第1代時無法長成單層;而從妊娠期小鼠穫得的乳腺上皮細胞傳至第3代時纔無法長成單層;凍存後複囌的乳腺細胞在培養過程中仍然具有典型的上皮細胞形態,併且增殖旺盛.
이무균수술법취건강임신기、비유기곤명소백서적유선조직,용이단백매、효원매I분단소화법획득소서유선세포.생장배양액위DMEM/F12,함10%태우혈청,첨가이도소(5 ug/mL)、EGF(5 ng/mL)、경화가적송(1 ug/mL)、청매소(200 IU/mL)급련매소(O.1 mg/mL).종유선조직중획득적세포직접방입-80 c빙상중진행동존,동존액위DMEM/F12,함20%태우혈청、10%DMSO.용도치현미경관찰세포형태,발현유선조직소화후즉가획득정원병상적상피세포;배양과정중,유선상피세포적형태이아란석형화다각형위주,증식가형성유두상결구,칭지위유구체,대량증식후형성원정형결구.세포핵정원형혹타원형,재전대과정중,유선상피세포가형성도서상적폐합형세포군,변계청석,세포지간결합긴밀,세포간정랍망결구.결과표명:획득전형상피세포형태적소서유선세포원대배양물,종비유기소서획득적유선상피세포전지제1대시무법장성단층;이종임신기소서획득적유선상피세포전지제3대시재무법장성단층;동존후복소적유선세포재배양과정중잉연구유전형적상피세포형태,병차증식왕성.
