浙江大学学报(医学版)
浙江大學學報(醫學版)
절강대학학보(의학판)
JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2009年
1期
7-14
,共8页
刘君%虎义平%姜启英%陈丹%余海%王青青%汤谷平
劉君%虎義平%薑啟英%陳丹%餘海%王青青%湯穀平
류군%호의평%강계영%진단%여해%왕청청%탕곡평
聚乙烯亚胺%β环糊精类%遗传载体%转染%质粒%肽类%肿瘤/治疗
聚乙烯亞胺%β環糊精類%遺傳載體%轉染%質粒%肽類%腫瘤/治療
취을희아알%β배호정류%유전재체%전염%질립%태류%종류/치료
目的:多肽MC10 (MARAKEGGGC)介导的聚乙烯亚胺-β-环糊精聚合物载体作为新型靶向性非病毒基因载体的研究.方法:低分子量的聚乙烯亚胺(PEI)通过羰二咪唑(1,1'-carbonyl-diimidazole,CDI)偶联β-环糊精(β-CyD)合成聚乙烯亚胺-β-环糊精(PEI-β-CyD)作为载体骨架,用琥珀酰亚胺-3-(2-嘧啶二硫)丙酸酯[N-succinimidy-3-(2-pyridyldithio)propionate,SPDP]将MC10偶联到PEI-β-CyD上,制成新型转基因载体材料MC10-PEI-β-CyD.用核磁共振氢谱(1H-NMR)对载体的结构进行化学表征,凝胶电泳阻滞实验研究载体材料对质粒DNA的浓缩能力,透射电镜观察其浓缩质粒DNA后形成的微粒粒径.MTT法检测聚合物的毒性,用SKOV-3、A549和MCF-7细胞株进行体外转基因实验,确定MC10-PEI-β-CyD具有基因携带能力及靶向选择性.结果:成功地合成了MC10-PEI-β-CyD,且MC10-PEI-β-CyD在N/P为5时,能够有效浓缩质粒DNA,形成粒径约为(170±35)nm的微粒.结论:MC10-PEI-β-CyD具有低毒和高转基因效率,对Her-2受体的肿瘤细胞具有很好的靶向性.
目的:多肽MC10 (MARAKEGGGC)介導的聚乙烯亞胺-β-環糊精聚閤物載體作為新型靶嚮性非病毒基因載體的研究.方法:低分子量的聚乙烯亞胺(PEI)通過羰二咪唑(1,1'-carbonyl-diimidazole,CDI)偶聯β-環糊精(β-CyD)閤成聚乙烯亞胺-β-環糊精(PEI-β-CyD)作為載體骨架,用琥珀酰亞胺-3-(2-嘧啶二硫)丙痠酯[N-succinimidy-3-(2-pyridyldithio)propionate,SPDP]將MC10偶聯到PEI-β-CyD上,製成新型轉基因載體材料MC10-PEI-β-CyD.用覈磁共振氫譜(1H-NMR)對載體的結構進行化學錶徵,凝膠電泳阻滯實驗研究載體材料對質粒DNA的濃縮能力,透射電鏡觀察其濃縮質粒DNA後形成的微粒粒徑.MTT法檢測聚閤物的毒性,用SKOV-3、A549和MCF-7細胞株進行體外轉基因實驗,確定MC10-PEI-β-CyD具有基因攜帶能力及靶嚮選擇性.結果:成功地閤成瞭MC10-PEI-β-CyD,且MC10-PEI-β-CyD在N/P為5時,能夠有效濃縮質粒DNA,形成粒徑約為(170±35)nm的微粒.結論:MC10-PEI-β-CyD具有低毒和高轉基因效率,對Her-2受體的腫瘤細胞具有很好的靶嚮性.
목적:다태MC10 (MARAKEGGGC)개도적취을희아알-β-배호정취합물재체작위신형파향성비병독기인재체적연구.방법:저분자량적취을희아알(PEI)통과탄이미서(1,1'-carbonyl-diimidazole,CDI)우련β-배호정(β-CyD)합성취을희아알-β-배호정(PEI-β-CyD)작위재체골가,용호박선아알-3-(2-밀정이류)병산지[N-succinimidy-3-(2-pyridyldithio)propionate,SPDP]장MC10우련도PEI-β-CyD상,제성신형전기인재체재료MC10-PEI-β-CyD.용핵자공진경보(1H-NMR)대재체적결구진행화학표정,응효전영조체실험연구재체재료대질립DNA적농축능력,투사전경관찰기농축질립DNA후형성적미립립경.MTT법검측취합물적독성,용SKOV-3、A549화MCF-7세포주진행체외전기인실험,학정MC10-PEI-β-CyD구유기인휴대능력급파향선택성.결과:성공지합성료MC10-PEI-β-CyD,차MC10-PEI-β-CyD재N/P위5시,능구유효농축질립DNA,형성립경약위(170±35)nm적미립.결론:MC10-PEI-β-CyD구유저독화고전기인효솔,대Her-2수체적종류세포구유흔호적파향성.
