食品与药品
食品與藥品
식품여약품
FOOD AND DRUG
2009年
5期
5-8
,共4页
高鹏%赵健%傅文彬%王富军%袁勤生%刘建文
高鵬%趙健%傅文彬%王富軍%袁勤生%劉建文
고붕%조건%부문빈%왕부군%원근생%류건문
TAT-凋亡蛋白%包涵体表达%制备%抗肿瘤活性
TAT-凋亡蛋白%包涵體錶達%製備%抗腫瘤活性
TAT-조망단백%포함체표체%제비%항종류활성
目的 制备TAT-凋亡蛋白质并研究其抗肿瘤活性.方法 将重组质粒pET-28b-TAT-vp3转/N.E.coli BL21(DE3)中表达其蛋白质,利用Ni-NTA亲和柱纯化目的 蛋白质包涵体,纯化样品透析复性后研究其抗肿瘤活性.结果 30℃时重组蛋白质包涵体表达量最高,尿素变性条件下用Ni-NTA亲和柱层析纯化包涵体,用500 mmol/L咪唑溶液洗脱,从镍柱上解离的目标蛋白质纯度达到92%以上.MTT实验表明,纯化后蛋白质浓度10μg/mL时,HeLa细胞存活率降至42%(ICso=4.2μg/mL);动物实验表明,样品组抑瘤率可达到48.3%.结论 大肠杆菌表达的TAT-凋亡蛋白质具有抗肿瘤效应.
目的 製備TAT-凋亡蛋白質併研究其抗腫瘤活性.方法 將重組質粒pET-28b-TAT-vp3轉/N.E.coli BL21(DE3)中錶達其蛋白質,利用Ni-NTA親和柱純化目的 蛋白質包涵體,純化樣品透析複性後研究其抗腫瘤活性.結果 30℃時重組蛋白質包涵體錶達量最高,尿素變性條件下用Ni-NTA親和柱層析純化包涵體,用500 mmol/L咪唑溶液洗脫,從鎳柱上解離的目標蛋白質純度達到92%以上.MTT實驗錶明,純化後蛋白質濃度10μg/mL時,HeLa細胞存活率降至42%(ICso=4.2μg/mL);動物實驗錶明,樣品組抑瘤率可達到48.3%.結論 大腸桿菌錶達的TAT-凋亡蛋白質具有抗腫瘤效應.
목적 제비TAT-조망단백질병연구기항종류활성.방법 장중조질립pET-28b-TAT-vp3전/N.E.coli BL21(DE3)중표체기단백질,이용Ni-NTA친화주순화목적 단백질포함체,순화양품투석복성후연구기항종류활성.결과 30℃시중조단백질포함체표체량최고,뇨소변성조건하용Ni-NTA친화주층석순화포함체,용500 mmol/L미서용액세탈,종얼주상해리적목표단백질순도체도92%이상.MTT실험표명,순화후단백질농도10μg/mL시,HeLa세포존활솔강지42%(ICso=4.2μg/mL);동물실험표명,양품조억류솔가체도48.3%.결론 대장간균표체적TAT-조망단백질구유항종류효응.
