CAJ | 학술논문

目的验证诱饵质粒pBD-DOC-1在酵母双杂交系统的自激活性及毒性作用,为应用酵母双杂交系统(yeast two-hybrid system)筛选与p12DOC-1/CDK2-AP1相互作用的蛋白建立实验基础.方法将诱饵质粒pBD-DOC-1转化到酵母细胞MAV203中,检测诱饵蛋白有无毒性和自激活作用.同时利用对照质粒组筛选组氨酸(His)本底表达抑制剂3AT(3-氨基-1,2,4-三唑)的合适工作浓度.结果诱饵质粒pBD-DOC-1成功转化到酵母细胞MAV203中,对宿主酵母细胞无毒性,对报告基因无自激活作用.确定了组氨酸(His)本底表达抑制剂3AT(3-氨基-1,2,4-三唑)的合适工作浓度.结论诱饵质粒pBD-DOC-1可以用于酵母双杂交实验,为进一步运用酵母双杂交技术在人类组织cDNA文库中筛选与之相互作用的蛋白奠定了基础.
목적 험증유이질립pBD-DOC-1재효모쌍잡교계통적자격활성급독성작용,위응용효모쌍잡교계통(yeast two-hybrid system)사선여p12DOC-1/CDK2-AP1상호작용적단백건립실험기출.방법 장유이질립pBD-DOC-1전화도효모세포MAV203중,검측유이단백유무독성화자격활작용.동시이용대조질립조사선조안산(His)본저표체억제제3AT(3-안기-1,2,4-삼서)적합괄공작농도.결과 유이질립pBD-DOC-1성공전화도효모세포MAV203중,대숙주효모세포무독성,대보고기인무자격활작용.학정료조안산(His)본저표체억제제3AT(3-안기-1,2,4-삼서)적합괄공작농도.결론 유이질립pBD-DOC-1가이용우효모쌍잡교실험,위진일보운용효모쌍잡교기술재인류조직cDNA문고중사선여지상호작용적단백전정료기출.