天津医药
天津醫藥
천진의약
TIANJIN MEDICAL JOURNAL
2010年
6期
449-451,后插1
,共4页
罗小洋%邬柏林%胡桂梅%罗忠金%郭武华%张吉翔
囉小洋%鄔柏林%鬍桂梅%囉忠金%郭武華%張吉翔
라소양%오백림%호계매%라충금%곽무화%장길상
癌,肝细胞%细胞系,肿瘤%RNA干扰%基因%RNA结合蛋白质类%转染%细胞周期蛋白D1
癌,肝細胞%細胞繫,腫瘤%RNA榦擾%基因%RNA結閤蛋白質類%轉染%細胞週期蛋白D1
암,간세포%세포계,종류%RNA간우%기인%RNA결합단백질류%전염%세포주기단백D1
目的:探讨siRNA沉默人肝癌细胞Hep3B中p62基因对人肝癌细胞的生物学影响.方法:人肝癌细胞Hep3B为靶细胞,siRNA通过Lipofectamine 2000转染Hep3B.首先从3条siRNA序列中筛选出1条沉默p62的最佳序列,然后将细胞分为空白对照组、siRNA组、Ncontrol(NC)组及脂质体(Lip)组.分别用RT-PCR和Western blot法检测各组细胞中p62、XPD、p53以及cyclinD1的mRNA和蛋白质的表达量,并用MTY法检测各组细胞的增殖能力.结果:siRNA组中p62、XPD、p53的mRNA表达较其他3组显著下调(P<0.01),而siRNA组中cyclinD1的mRNA表达较其他3组明显七调(P<0.01).Western blot检测结果显示各组细胞中p62、XPD、p53及cyclinD1的蛋白表达变化趋势与其mRNA变化趋势相一致.MTT检测显示siRNA沉默p62后,细胞增殖能力增强.结论:p62基因可能通过影响XPD、p53及cyclinD1从而抑制癌细胞生长,并且可能通过DNA损伤检控点来调控细胞增殖.
目的:探討siRNA沉默人肝癌細胞Hep3B中p62基因對人肝癌細胞的生物學影響.方法:人肝癌細胞Hep3B為靶細胞,siRNA通過Lipofectamine 2000轉染Hep3B.首先從3條siRNA序列中篩選齣1條沉默p62的最佳序列,然後將細胞分為空白對照組、siRNA組、Ncontrol(NC)組及脂質體(Lip)組.分彆用RT-PCR和Western blot法檢測各組細胞中p62、XPD、p53以及cyclinD1的mRNA和蛋白質的錶達量,併用MTY法檢測各組細胞的增殖能力.結果:siRNA組中p62、XPD、p53的mRNA錶達較其他3組顯著下調(P<0.01),而siRNA組中cyclinD1的mRNA錶達較其他3組明顯七調(P<0.01).Western blot檢測結果顯示各組細胞中p62、XPD、p53及cyclinD1的蛋白錶達變化趨勢與其mRNA變化趨勢相一緻.MTT檢測顯示siRNA沉默p62後,細胞增殖能力增彊.結論:p62基因可能通過影響XPD、p53及cyclinD1從而抑製癌細胞生長,併且可能通過DNA損傷檢控點來調控細胞增殖.
목적:탐토siRNA침묵인간암세포Hep3B중p62기인대인간암세포적생물학영향.방법:인간암세포Hep3B위파세포,siRNA통과Lipofectamine 2000전염Hep3B.수선종3조siRNA서렬중사선출1조침묵p62적최가서렬,연후장세포분위공백대조조、siRNA조、Ncontrol(NC)조급지질체(Lip)조.분별용RT-PCR화Western blot법검측각조세포중p62、XPD、p53이급cyclinD1적mRNA화단백질적표체량,병용MTY법검측각조세포적증식능력.결과:siRNA조중p62、XPD、p53적mRNA표체교기타3조현저하조(P<0.01),이siRNA조중cyclinD1적mRNA표체교기타3조명현칠조(P<0.01).Western blot검측결과현시각조세포중p62、XPD、p53급cyclinD1적단백표체변화추세여기mRNA변화추세상일치.MTT검측현시siRNA침묵p62후,세포증식능력증강.결론:p62기인가능통과영향XPD、p53급cyclinD1종이억제암세포생장,병차가능통과DNA손상검공점래조공세포증식.
