中国急救医学
中國急救醫學
중국급구의학
CHINESE JOURNAL OF CRITICAL CARE MEDICINE
2011年
7期
618-624
,共7页
王瑛%孙志扬%降建新%张夔鸣%许国强%李光
王瑛%孫誌颺%降建新%張夔鳴%許國彊%李光
왕영%손지양%강건신%장기명%허국강%리광
脊髓损伤%转基因小鼠%B细胞淋巴瘤/白血病-2差异表达蛋白质%蛋白质组学%质谱
脊髓損傷%轉基因小鼠%B細胞淋巴瘤/白血病-2差異錶達蛋白質%蛋白質組學%質譜
척수손상%전기인소서%B세포림파류/백혈병-2차이표체단백질%단백질조학%질보
目的 通过建立B细胞淋巴瘤/白血病-2(B-cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)高表达转基因小鼠与野生型小鼠急性脊髓损伤组织的双向电泳图谱,比较蛋白质组的变化和差异表达,初步探讨Bcl-2保护脊髓损伤的分子机制.方法 转基因(A组)及同窝非转基因小鼠(B组)各15只,随机分为三组(1 d、7 d、14 d),采用垂直打击(weight dropping,WD)方法,以2.5×3.0 g·cm致伤力致伤小鼠脊髓.于术后1 d、7 d、14 d处死,取脊髓标本进行检测:①采用双向凝胶电泳分离脊髓总蛋白,建立双向凝胶电泳图谱;②用ImageMaster 软件分析图像,基质辅助激光解析电离飞行时间,质谱(MALDI2TOF2MS) 分析获取肽质量指纹图谱(PMF);③用Mascot软件系统和NCBIMS数据库检索确定蛋白质.结果 鉴定出差异蛋白质33个,其中1 d 8个,7 d 12个,14 d 13个.与B组小鼠比较,A组小鼠表达上调的蛋白质有热休克蛋白、含缬酪肽蛋白、peroxiredoxin 6等,下调的蛋白质为钙蛋白酶、泛素羧基末端水解酶-1等.多数差异蛋白质涉及到应激保护、抗氧自由基损伤、促进神经修复等过程,具有神经保护功能.结论 除了抗凋亡作用,Bcl-2蛋白可能还具有抗氧自由基损伤、促进神经修复、加强应激等多方面的神经保护功能.
目的 通過建立B細胞淋巴瘤/白血病-2(B-cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)高錶達轉基因小鼠與野生型小鼠急性脊髓損傷組織的雙嚮電泳圖譜,比較蛋白質組的變化和差異錶達,初步探討Bcl-2保護脊髓損傷的分子機製.方法 轉基因(A組)及同窩非轉基因小鼠(B組)各15隻,隨機分為三組(1 d、7 d、14 d),採用垂直打擊(weight dropping,WD)方法,以2.5×3.0 g·cm緻傷力緻傷小鼠脊髓.于術後1 d、7 d、14 d處死,取脊髓標本進行檢測:①採用雙嚮凝膠電泳分離脊髓總蛋白,建立雙嚮凝膠電泳圖譜;②用ImageMaster 軟件分析圖像,基質輔助激光解析電離飛行時間,質譜(MALDI2TOF2MS) 分析穫取肽質量指紋圖譜(PMF);③用Mascot軟件繫統和NCBIMS數據庫檢索確定蛋白質.結果 鑒定齣差異蛋白質33箇,其中1 d 8箇,7 d 12箇,14 d 13箇.與B組小鼠比較,A組小鼠錶達上調的蛋白質有熱休剋蛋白、含纈酪肽蛋白、peroxiredoxin 6等,下調的蛋白質為鈣蛋白酶、汎素羧基末耑水解酶-1等.多數差異蛋白質涉及到應激保護、抗氧自由基損傷、促進神經脩複等過程,具有神經保護功能.結論 除瞭抗凋亡作用,Bcl-2蛋白可能還具有抗氧自由基損傷、促進神經脩複、加彊應激等多方麵的神經保護功能.
목적 통과건립B세포림파류/백혈병-2(B-cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)고표체전기인소서여야생형소서급성척수손상조직적쌍향전영도보,비교단백질조적변화화차이표체,초보탐토Bcl-2보호척수손상적분자궤제.방법 전기인(A조)급동와비전기인소서(B조)각15지,수궤분위삼조(1 d、7 d、14 d),채용수직타격(weight dropping,WD)방법,이2.5×3.0 g·cm치상력치상소서척수.우술후1 d、7 d、14 d처사,취척수표본진행검측:①채용쌍향응효전영분리척수총단백,건립쌍향응효전영도보;②용ImageMaster 연건분석도상,기질보조격광해석전리비행시간,질보(MALDI2TOF2MS) 분석획취태질량지문도보(PMF);③용Mascot연건계통화NCBIMS수거고검색학정단백질.결과 감정출차이단백질33개,기중1 d 8개,7 d 12개,14 d 13개.여B조소서비교,A조소서표체상조적단백질유열휴극단백、함힐락태단백、peroxiredoxin 6등,하조적단백질위개단백매、범소최기말단수해매-1등.다수차이단백질섭급도응격보호、항양자유기손상、촉진신경수복등과정,구유신경보호공능.결론 제료항조망작용,Bcl-2단백가능환구유항양자유기손상、촉진신경수복、가강응격등다방면적신경보호공능.
