CAJ | 학술논문

[目的]建立间日疟原虫环子孢子蛋白(CSP)基因分型法用于地理株的鉴定.[方法]Chelex-100离子交换法提取滤纸血样中的微量DNA;套式PCR和等位特异PCR技术、琼脂糖电泳分析法、斑点印迹和Southern印迹-探针杂交技术分别用于判别性片段的扩增、分析和鉴定.[结果]用本文描述的套式-等位-特异PCR分型法,从一小片滤纸血样提取的微量DNA中,扩增出不同长度范围的3种判别性片段:650～770bp(间日疟种特异),150～230 bp(温带族特异),588～615 bp(PV-2型特异).用本法检测参考虫株出现的带型和长度与设计的靶序列完全吻合.检测59份国内感染血样,42份鉴定为温带族虫株,15份为热带族虫株,2份为PV-2型虫株.4份境外感染血样中,2个巴基斯坦分离株均为温带族,缅甸和老挝各1株均为热带族虫株.[结论]①本法能同时区分PV-1型,PV-2型以及温带族与热带族虫株,且较现有(PCR-探针杂交)法更为简便、快捷;②现场血样初步检测结果显示:我国存在PV-1型(温带族与热带族)虫株和PV-2型虫株,也可能存在温带族东南亚组虫株.
[목적]건립간일학원충배자포자단백(CSP)기인분형법용우지리주적감정.[방법]Chelex-100리자교환법제취려지혈양중적미량DNA;투식PCR화등위특이PCR기술、경지당전영분석법、반점인적화Southern인적-탐침잡교기술분별용우판별성편단적확증、분석화감정.[결과]용본문묘술적투식-등위-특이PCR분형법,종일소편려지혈양제취적미량DNA중,확증출불동장도범위적3충판별성편단:650～770bp(간일학충특이),150～230 bp(온대족특이),588～615 bp(PV-2형특이).용본법검측삼고충주출현적대형화장도여설계적파서렬완전문합.검측59빈국내감염혈양,42빈감정위온대족충주,15빈위열대족충주,2빈위PV-2형충주.4빈경외감염혈양중,2개파기사탄분리주균위온대족,면전화로과각1주균위열대족충주.[결론]①본법능동시구분PV-1형,PV-2형이급온대족여열대족충주,차교현유(PCR-탐침잡교)법경위간편、쾌첩;②현장혈양초보검측결과현시:아국존재PV-1형(온대족여열대족)충주화PV-2형충주,야가능존재온대족동남아조충주.