CAJ | 학술논문

目的:探讨短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)介导的靶向EGFR基因的RNA干扰(RNA interference, RNAi)对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC) 细胞A549的凋亡诱导作用.方法:构建靶向人EGFR基因的表达shRNA的质粒(pShEGFR),转染A549细胞,应用RT-PCR分析EGFR mRNA的表达情况,采用MTT法检测A549细胞的生长状况,通过流式细胞仪以及PI染色法进行细胞凋亡的定量检测和形态学分析.结果:pShEGFR转染组A549细胞中EGFR mRNA的表达水平,较转染同一载体连接无关序列的对照组(pShNEG组)、单纯脂质体组及PBS阴性对照组A549细胞均明显降低,F=425.640, P=0.000,其中较PBS阴性对照组细胞降低了74.5%.转染pShEGFR的A549细胞与3种不同对照组细胞相比,生长受到明显抑制,F=107.428, P=0.000,生长抑制率达54.9%,而转染pShNEG组和单纯脂质体组的A549细胞生长抑制率则分别为20%和3.1%.流式细胞仪检测结果显示,pShEGFR组细胞存在32.8%的凋亡率,PI荧光染色可见pShEGFR组细胞呈现出典型的凋亡形态学变化.结论:质粒介导的靶向人EGFR基因的pShEGFR能够有效地干扰NSCLC细胞系A549中EGFR基因的表达,进而抑制肿瘤细胞的生长,诱导肿瘤细胞的凋亡.
목적:탐토단발협상RNA(short hairpin RNA,shRNA)개도적파향EGFR기인적RNA간우(RNA interference, RNAi)대비소세포폐암(non-small cell lung cancer,NSCLC) 세포A549적조망유도작용.방법:구건파향인EGFR기인적표체shRNA적질립(pShEGFR),전염A549세포,응용RT-PCR분석EGFR mRNA적표체정황,채용MTT법검측A549세포적생장상황,통과류식세포의이급PI염색법진행세포조망적정량검측화형태학분석.결과:pShEGFR전염조A549세포중EGFR mRNA적표체수평,교전염동일재체련접무관서렬적대조조(pShNEG조)、단순지질체조급PBS음성대조조A549세포균명현강저,F=425.640, P=0.000,기중교PBS음성대조조세포강저료74.5%.전염pShEGFR적A549세포여3충불동대조조세포상비,생장수도명현억제,F=107.428, P=0.000,생장억제솔체54.9%,이전염pShNEG조화단순지질체조적A549세포생장억제솔칙분별위20%화3.1%.류식세포의검측결과현시,pShEGFR조세포존재32.8%적조망솔,PI형광염색가견pShEGFR조세포정현출전형적조망형태학변화.결론:질립개도적파향인EGFR기인적pShEGFR능구유효지간우NSCLC세포계A549중EGFR기인적표체,진이억제종류세포적생장,유도종류세포적조망.