CAJ | 학술논문

[目的]调查我国植物花上的螺原体的存在,搜集我国的螺原体资源,并研究它们的基本生物学特性.[方法]常规螺原体分离、培养方法,应用暗视野显微镜和透射电子显微镜观察螺原体形态,根据16S rDNA和ITS序列构建系统发育树研究螺原体分离菌株可能的分类地位.[结果]分别从油菜(Brassica napus)、杜鹃(Rhododendron simsii)、红花酢浆草(Oxalis corymbosa)3种植物花表分离到4株螺原体CNR-1和CNR-2、CNA-1、CRW-1,对其形态、部分生理生化特性及分子生物学特性进行了初步研究.这4株螺原体在R-2液体培养基中生长良好,都能通过孔径为0.22 μm的微孔滤膜;在R-2固体培养基上呈圆形或颗粒状菌落,菌落直径约50～600 μm;在生长的某个阶段可呈典型的螺旋状,菌体直径为37.04～370.40 nm,长度约0.89～11.88 μm;它们都能利用葡萄糖作为碳源,不能利用尿素;在不含胎牛血清的R-2培养基中,它们都不能生长;菌株CNR-1、CNA-1能强烈代谢精氨酸,而CNR-2和CRW-1不能代谢精氨酸;在氨苄青霉素钠浓度高达2000 U/mL的R-2培养基中,分离菌株生长良好.根据16S rDNA序列构建的系统发育树显示,分离菌株CNR-1和CNR-2、CNA-1与蜜蜂螺原体Spiroplasma melliferum聚类较近,而CRW-1与S.clarkii聚类较近;根据ITS序列构建的系统发育树显示,CRW-1形成一个单独的分枝,其它3个菌株仍与S.melliferum聚类.[结论]以上结果初步表明,分离菌株CNR-1和CNR-2、CNA-1极有可能是spiroplasma melliferum,而CRW-1可能是一个新的螺原体种,但还需要血清学试验进一步验证.
[목적]조사아국식물화상적라원체적존재,수집아국적라원체자원,병연구타문적기본생물학특성.[방법]상규라원체분리、배양방법,응용암시야현미경화투사전자현미경관찰라원체형태,근거16S rDNA화ITS서렬구건계통발육수연구라원체분리균주가능적분류지위.[결과]분별종유채(Brassica napus)、두견(Rhododendron simsii)、홍화작장초(Oxalis corymbosa)3충식물화표분리도4주라원체CNR-1화CNR-2、CNA-1、CRW-1,대기형태、부분생리생화특성급분자생물학특성진행료초보연구.저4주라원체재R-2액체배양기중생장량호,도능통과공경위0.22 μm적미공려막;재R-2고체배양기상정원형혹과립상균락,균락직경약50～600 μm;재생장적모개계단가정전형적라선상,균체직경위37.04～370.40 nm,장도약0.89～11.88 μm;타문도능이용포도당작위탄원,불능이용뇨소;재불함태우혈청적R-2배양기중,타문도불능생장;균주CNR-1、CNA-1능강렬대사정안산,이CNR-2화CRW-1불능대사정안산;재안변청매소납농도고체2000 U/mL적R-2배양기중,분리균주생장량호.근거16S rDNA서렬구건적계통발육수현시,분리균주CNR-1화CNR-2、CNA-1여밀봉라원체Spiroplasma melliferum취류교근,이CRW-1여S.clarkii취류교근;근거ITS서렬구건적계통발육수현시,CRW-1형성일개단독적분지,기타3개균주잉여S.melliferum취류.[결론]이상결과초보표명,분리균주CNR-1화CNR-2、CNA-1겁유가능시spiroplasma melliferum,이CRW-1가능시일개신적라원체충,단환수요혈청학시험진일보험증.