西北大学学报（自然科学版）
西北大學學報（自然科學版）
서북대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF NORTHWEST UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2008年
4期
605-608
,共4页
王亚妮%黄宗炎%朱娟莉%董兆麟%崔亚丽%陈超
王亞妮%黃宗炎%硃娟莉%董兆麟%崔亞麗%陳超
왕아니%황종염%주연리%동조린%최아려%진초
乙肝表面抗原%分泌表达%毕赤酵母
乙肝錶麵抗原%分泌錶達%畢赤酵母
을간표면항원%분비표체%필적효모
目的 对分泌型毕赤酵母中表达乙肝表面抗原并进行亲和层析纯化.方法 从已确诊的乙肝患者阳性血清中提取乙肝病毒DNA,PCR扩增乙肝病毒表面抗原编码基因S,将其插入含有α分泌信号肽序列和6个组氨酸纯化标签的毕赤酵母表达栽体pPICZα,成功构建了重组表达栽体pPlCzα-HBVs.电转化酵母菌株GS115,得到重组乙肝表面抗原S的酵母表达菌株.结果 诱导培养基BMMY中甲醇终浓度为1%.诱导表达48 h重组蛋白表达量及抗原性达到最高.非变性条件下亲和层析纯化后,薄层扫描分析得到纯度超过95%,表达量约为2 mg/L的重组蛋白.结论 Westem-blot和ELISA分析表明,所得产物为乙肝表面抗原S蛋白,其纯度和产量足以免疫小鼠制备单克隆抗体.
目的 對分泌型畢赤酵母中錶達乙肝錶麵抗原併進行親和層析純化.方法 從已確診的乙肝患者暘性血清中提取乙肝病毒DNA,PCR擴增乙肝病毒錶麵抗原編碼基因S,將其插入含有α分泌信號肽序列和6箇組氨痠純化標籤的畢赤酵母錶達栽體pPICZα,成功構建瞭重組錶達栽體pPlCzα-HBVs.電轉化酵母菌株GS115,得到重組乙肝錶麵抗原S的酵母錶達菌株.結果 誘導培養基BMMY中甲醇終濃度為1%.誘導錶達48 h重組蛋白錶達量及抗原性達到最高.非變性條件下親和層析純化後,薄層掃描分析得到純度超過95%,錶達量約為2 mg/L的重組蛋白.結論 Westem-blot和ELISA分析錶明,所得產物為乙肝錶麵抗原S蛋白,其純度和產量足以免疫小鼠製備單剋隆抗體.
목적 대분비형필적효모중표체을간표면항원병진행친화층석순화.방법 종이학진적을간환자양성혈청중제취을간병독DNA,PCR확증을간병독표면항원편마기인S,장기삽입함유α분비신호태서렬화6개조안산순화표첨적필적효모표체재체pPICZα,성공구건료중조표체재체pPlCzα-HBVs.전전화효모균주GS115,득도중조을간표면항원S적효모표체균주.결과 유도배양기BMMY중갑순종농도위1%.유도표체48 h중조단백표체량급항원성체도최고.비변성조건하친화층석순화후,박층소묘분석득도순도초과95%,표체량약위2 mg/L적중조단백.결론 Westem-blot화ELISA분석표명,소득산물위을간표면항원S단백,기순도화산량족이면역소서제비단극륭항체.
