中国生化药物杂志
中國生化藥物雜誌
중국생화약물잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMICAL PHARMACEUTICS
2009年
1期
38-40
,共3页
葡萄球菌蛋白A%抗体结合区%克隆%表达
葡萄毬菌蛋白A%抗體結閤區%剋隆%錶達
포도구균단백A%항체결합구%극륭%표체
目的 构建表达金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)抗体结合区基因SPA-ZZ的pET-32a-ZZ表达载体,在大肠杆菌BL21中进行高效表达并初步纯化.方法 用PCR从pEZZ18中克隆SPA抗体结合区基因ZZ构建重组表达质粒pET32-ZZ,经酶切和测序确认,将阳性重组质粒转化BL21感受态细菌,IPTG诱导表达,表达产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳检测(SDS-PAGE),并用Q-Sephrose Fast Flow柱进行初步纯化.结果 得到了高效表达SPA-ZZ的pET32-ZZ表达载体,表达产物经SDS-PAGE检测相对分子质量为41 000,初步纯化后可得到较纯的表达蛋白.结论 SPA抗体结合区蛋白ZZ能在大肠杆菌中高效表达,为SPA-ZZ的应用奠定了一定的基础.
目的 構建錶達金黃色葡萄毬菌A蛋白(SPA)抗體結閤區基因SPA-ZZ的pET-32a-ZZ錶達載體,在大腸桿菌BL21中進行高效錶達併初步純化.方法 用PCR從pEZZ18中剋隆SPA抗體結閤區基因ZZ構建重組錶達質粒pET32-ZZ,經酶切和測序確認,將暘性重組質粒轉化BL21感受態細菌,IPTG誘導錶達,錶達產物進行聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測(SDS-PAGE),併用Q-Sephrose Fast Flow柱進行初步純化.結果 得到瞭高效錶達SPA-ZZ的pET32-ZZ錶達載體,錶達產物經SDS-PAGE檢測相對分子質量為41 000,初步純化後可得到較純的錶達蛋白.結論 SPA抗體結閤區蛋白ZZ能在大腸桿菌中高效錶達,為SPA-ZZ的應用奠定瞭一定的基礎.
목적 구건표체금황색포도구균A단백(SPA)항체결합구기인SPA-ZZ적pET-32a-ZZ표체재체,재대장간균BL21중진행고효표체병초보순화.방법 용PCR종pEZZ18중극륭SPA항체결합구기인ZZ구건중조표체질립pET32-ZZ,경매절화측서학인,장양성중조질립전화BL21감수태세균,IPTG유도표체,표체산물진행취병희선알응효전영검측(SDS-PAGE),병용Q-Sephrose Fast Flow주진행초보순화.결과 득도료고효표체SPA-ZZ적pET32-ZZ표체재체,표체산물경SDS-PAGE검측상대분자질량위41 000,초보순화후가득도교순적표체단백.결론 SPA항체결합구단백ZZ능재대장간균중고효표체,위SPA-ZZ적응용전정료일정적기출.
