中国药理学与毒理学杂志
中國藥理學與毒理學雜誌
중국약이학여독이학잡지
CHINESE JOURNAL OF PHARMACOLOGY AND TOXICOLOGY
2009年
2期
122-127
,共6页
李长岭%樊友启%傅国胜%范伟民%孙勇
李長嶺%樊友啟%傅國勝%範偉民%孫勇
리장령%번우계%부국성%범위민%손용
受体,红细胞生成素%骨髓间充质干细胞%蛋白表达%细胞凋亡
受體,紅細胞生成素%骨髓間充質榦細胞%蛋白錶達%細胞凋亡
수체,홍세포생성소%골수간충질간세포%단백표체%세포조망
目的 研究重组人红细胞生成素(rhEpo)处理骨髓间充质干细胞(MSCs)后对Epo受体(EpoR)的影响.方法 含rhEpo 0, 5及10 Ku·L-1的培养基培养MSCs 24, 48及72 h后,MTT法检测细胞增殖;6 d后,免疫荧光染色检测EpoR阳性的细胞百分率.rhEpo预处理24 h, 再缺氧处理48 h,Hoechst染色,通过形态变化检测细胞凋亡率;rhEpo预处理6 d,再缺氧处理48 h,Western蛋白印迹法检测EpoR,磷酸化Janus激酶2 (p-Jak2),磷酸化转导及转录活化蛋白(p-Stat5)及缺氧诱导因子-1a(Hif-1a)蛋白表达.结果 MTT结果显示,rhEpo处理的MSCs增殖能力增强;免疫荧光结果显示,随rhEpo浓度的增加,EpoR阳性细胞数增加;对照组,rhEpo 5及10 kU*L-1组EpoR阳性细胞百分率分别为(8.3±4.2)%, (24.7±8.1)%和(30.8±10.5)%.rhEpo预处理能增强MSCs抗缺氧凋亡的能力,缺氧处理后, 对照组、rhEpo 5及10 kU·L-1组细胞核固缩率分别为(42.2±8.7)%, (21.9±8.0)%和(20.1±7.9)%.Western蛋白印迹结果显示,rhEpo预处理及预处理后行低氧培养的MSCs,随rhEpo浓度的增加,EpoR及下游抗细胞凋亡蛋白p-Jak2,p-Stat5和Hif-1a蛋白表达增加.结论 rhEpo可以促进MSC EpoR的表达,并增加EpoR下游抗细胞凋亡蛋白的表达.
目的 研究重組人紅細胞生成素(rhEpo)處理骨髓間充質榦細胞(MSCs)後對Epo受體(EpoR)的影響.方法 含rhEpo 0, 5及10 Ku·L-1的培養基培養MSCs 24, 48及72 h後,MTT法檢測細胞增殖;6 d後,免疫熒光染色檢測EpoR暘性的細胞百分率.rhEpo預處理24 h, 再缺氧處理48 h,Hoechst染色,通過形態變化檢測細胞凋亡率;rhEpo預處理6 d,再缺氧處理48 h,Western蛋白印跡法檢測EpoR,燐痠化Janus激酶2 (p-Jak2),燐痠化轉導及轉錄活化蛋白(p-Stat5)及缺氧誘導因子-1a(Hif-1a)蛋白錶達.結果 MTT結果顯示,rhEpo處理的MSCs增殖能力增彊;免疫熒光結果顯示,隨rhEpo濃度的增加,EpoR暘性細胞數增加;對照組,rhEpo 5及10 kU*L-1組EpoR暘性細胞百分率分彆為(8.3±4.2)%, (24.7±8.1)%和(30.8±10.5)%.rhEpo預處理能增彊MSCs抗缺氧凋亡的能力,缺氧處理後, 對照組、rhEpo 5及10 kU·L-1組細胞覈固縮率分彆為(42.2±8.7)%, (21.9±8.0)%和(20.1±7.9)%.Western蛋白印跡結果顯示,rhEpo預處理及預處理後行低氧培養的MSCs,隨rhEpo濃度的增加,EpoR及下遊抗細胞凋亡蛋白p-Jak2,p-Stat5和Hif-1a蛋白錶達增加.結論 rhEpo可以促進MSC EpoR的錶達,併增加EpoR下遊抗細胞凋亡蛋白的錶達.
목적 연구중조인홍세포생성소(rhEpo)처리골수간충질간세포(MSCs)후대Epo수체(EpoR)적영향.방법 함rhEpo 0, 5급10 Ku·L-1적배양기배양MSCs 24, 48급72 h후,MTT법검측세포증식;6 d후,면역형광염색검측EpoR양성적세포백분솔.rhEpo예처리24 h, 재결양처리48 h,Hoechst염색,통과형태변화검측세포조망솔;rhEpo예처리6 d,재결양처리48 h,Western단백인적법검측EpoR,린산화Janus격매2 (p-Jak2),린산화전도급전록활화단백(p-Stat5)급결양유도인자-1a(Hif-1a)단백표체.결과 MTT결과현시,rhEpo처리적MSCs증식능력증강;면역형광결과현시,수rhEpo농도적증가,EpoR양성세포수증가;대조조,rhEpo 5급10 kU*L-1조EpoR양성세포백분솔분별위(8.3±4.2)%, (24.7±8.1)%화(30.8±10.5)%.rhEpo예처리능증강MSCs항결양조망적능력,결양처리후, 대조조、rhEpo 5급10 kU·L-1조세포핵고축솔분별위(42.2±8.7)%, (21.9±8.0)%화(20.1±7.9)%.Western단백인적결과현시,rhEpo예처리급예처리후행저양배양적MSCs,수rhEpo농도적증가,EpoR급하유항세포조망단백p-Jak2,p-Stat5화Hif-1a단백표체증가.결론 rhEpo가이촉진MSC EpoR적표체,병증가EpoR하유항세포조망단백적표체.
