中国中西医结合肾病杂志
中國中西醫結閤腎病雜誌
중국중서의결합신병잡지
CHINESE JOURNAL OF INTEGRATED TRADITIONAL AND WESTERN NEPHROLOGY
2009年
5期
382-385,插页1
,共5页
张懿%谌卫%刘先锋%房振宇%于建平%郭志勇%梅长林%程涛
張懿%諶衛%劉先鋒%房振宇%于建平%郭誌勇%梅長林%程濤
장의%심위%류선봉%방진우%우건평%곽지용%매장림%정도
骨髓细胞绿色荧光蛋白%竹叶青蛇毒%系膜增生型肾小球肾炎
骨髓細胞綠色熒光蛋白%竹葉青蛇毒%繫膜增生型腎小毬腎炎
골수세포록색형광단백%죽협청사독%계막증생형신소구신염
目的:利用骨髓移植的方法观察骨髓来源细胞在小鼠实验性肾小球肾炎中的作用.方法:以绿色荧光蛋白(GFP)标记的C57BL/6转基因小鼠为供体,同种无标记小鼠为受体鼠,受体鼠在接受供体骨髓细胞前经亚致死剂量60Co照射,并于移植5周后以尾静脉注射的方式接受竹叶青蛇毒注射;蛇毒注射后7、14、28、56 d利用免疫组织化学和免疫荧光双重染色方法观察受体鼠肾脏内的GFP阳性细胞及受体鼠肾脏病理变化,其中一组受体鼠在蛇毒注射后接受连续1周的粒巨系一集落刺激因子(GM-CSF)腹腔注射,观察GM-CSF对骨髓来源细胞及受体鼠的影响.结果:无论有无蛇毒损伤,荧光显微镜下受体鼠肾脏内均未见明亮的绿色荧光.GFP免疫组织化学可见所有受体鼠的肾小管上皮内均有少量细胞质棕褐色、细胞核大且紫蓝的GFP阳性细胞,包括那些骨髓移植后无蛇毒损伤的受体鼠;肾小球内也可见上述细胞,但在无蛇毒损伤的受体鼠内肾小球内未见上述细胞;激光共聚焦显微镜未见到明显双染色阳性的细胞,从形态上证实肾小球内的这些GFP阳性细胞大多为血细胞.那些接受GM-CSF注射的受体鼠肾脏内,GFP阳性细胞没有明显增加,而且肾脏损伤恶化,表现为蛇毒注射后1周出现了明显的局灶性节段性肾小球硬化.结论:骨髓来源细胞在蛇毒诱导的系膜增生型肾小球肾炎小鼠肾脏内向肾小管和肾小球细胞均可少量转化,但由于转化率低及肾小球结构的复杂性,向肾小球细胞的转化更加不易被识别;GM-CSF注射未能增加外源性骨髓细胞向肾脏实质细胞的转化而使受体鼠肾脏损伤恶化,于病程早期出现了局灶性节段性肾小球硬化.
目的:利用骨髓移植的方法觀察骨髓來源細胞在小鼠實驗性腎小毬腎炎中的作用.方法:以綠色熒光蛋白(GFP)標記的C57BL/6轉基因小鼠為供體,同種無標記小鼠為受體鼠,受體鼠在接受供體骨髓細胞前經亞緻死劑量60Co照射,併于移植5週後以尾靜脈註射的方式接受竹葉青蛇毒註射;蛇毒註射後7、14、28、56 d利用免疫組織化學和免疫熒光雙重染色方法觀察受體鼠腎髒內的GFP暘性細胞及受體鼠腎髒病理變化,其中一組受體鼠在蛇毒註射後接受連續1週的粒巨繫一集落刺激因子(GM-CSF)腹腔註射,觀察GM-CSF對骨髓來源細胞及受體鼠的影響.結果:無論有無蛇毒損傷,熒光顯微鏡下受體鼠腎髒內均未見明亮的綠色熒光.GFP免疫組織化學可見所有受體鼠的腎小管上皮內均有少量細胞質棕褐色、細胞覈大且紫藍的GFP暘性細胞,包括那些骨髓移植後無蛇毒損傷的受體鼠;腎小毬內也可見上述細胞,但在無蛇毒損傷的受體鼠內腎小毬內未見上述細胞;激光共聚焦顯微鏡未見到明顯雙染色暘性的細胞,從形態上證實腎小毬內的這些GFP暘性細胞大多為血細胞.那些接受GM-CSF註射的受體鼠腎髒內,GFP暘性細胞沒有明顯增加,而且腎髒損傷噁化,錶現為蛇毒註射後1週齣現瞭明顯的跼竈性節段性腎小毬硬化.結論:骨髓來源細胞在蛇毒誘導的繫膜增生型腎小毬腎炎小鼠腎髒內嚮腎小管和腎小毬細胞均可少量轉化,但由于轉化率低及腎小毬結構的複雜性,嚮腎小毬細胞的轉化更加不易被識彆;GM-CSF註射未能增加外源性骨髓細胞嚮腎髒實質細胞的轉化而使受體鼠腎髒損傷噁化,于病程早期齣現瞭跼竈性節段性腎小毬硬化.
목적:이용골수이식적방법관찰골수래원세포재소서실험성신소구신염중적작용.방법:이록색형광단백(GFP)표기적C57BL/6전기인소서위공체,동충무표기소서위수체서,수체서재접수공체골수세포전경아치사제량60Co조사,병우이식5주후이미정맥주사적방식접수죽협청사독주사;사독주사후7、14、28、56 d이용면역조직화학화면역형광쌍중염색방법관찰수체서신장내적GFP양성세포급수체서신장병리변화,기중일조수체서재사독주사후접수련속1주적립거계일집락자격인자(GM-CSF)복강주사,관찰GM-CSF대골수래원세포급수체서적영향.결과:무론유무사독손상,형광현미경하수체서신장내균미견명량적록색형광.GFP면역조직화학가견소유수체서적신소관상피내균유소량세포질종갈색、세포핵대차자람적GFP양성세포,포괄나사골수이식후무사독손상적수체서;신소구내야가견상술세포,단재무사독손상적수체서내신소구내미견상술세포;격광공취초현미경미견도명현쌍염색양성적세포,종형태상증실신소구내적저사GFP양성세포대다위혈세포.나사접수GM-CSF주사적수체서신장내,GFP양성세포몰유명현증가,이차신장손상악화,표현위사독주사후1주출현료명현적국조성절단성신소구경화.결론:골수래원세포재사독유도적계막증생형신소구신염소서신장내향신소관화신소구세포균가소량전화,단유우전화솔저급신소구결구적복잡성,향신소구세포적전화경가불역피식별;GM-CSF주사미능증가외원성골수세포향신장실질세포적전화이사수체서신장손상악화,우병정조기출현료국조성절단성신소구경화.