工业微生物
工業微生物
공업미생물
INDUSTRIAL MICROBIOLOGY
2009年
3期
45-50
,共6页
潘美平%何宁%王远鹏%邵文尧%孙道华%杨坤%卢英华%李清彪
潘美平%何寧%王遠鵬%邵文堯%孫道華%楊坤%盧英華%李清彪
반미평%하저%왕원붕%소문요%손도화%양곤%로영화%리청표
乙醇酸氧化酶%重组毕赤酵母%乙醛酸
乙醇痠氧化酶%重組畢赤酵母%乙醛痠
을순산양화매%중조필적효모%을철산
乙醇酸氧化酶(GO)是植物光呼吸途径中的一种关键酶,可以催化乙醇酸生产乙醛酸.从新鲜菠菜叶中提取总RNA,利用RT-PCR技术获得编码GO基因的cDNA片断.通过基因重组将GO基因克隆到载体pAO815中,构建了胞内表达载体pAO815/GO,重组质粒经电转整合至甲醇营养酵母GS115染色体. 在混合碳源为10 g/L山梨醇和0.5 g/L甲醇的培养条件下,细胞的GO酶活达到 474 IU/g (DCW). 利用该重组毕赤酵母作为催化剂生产乙醛酸,结果表明:在乙醇酸浓度为0.25 mol/L,重组酵母湿菌体为1O g/L,黄素单核苷酸(FMN)浓度为0.01 mmol/L, pH 8.0,20 ℃,反应18 h后乙醛酸的产率达到51.8%.
乙醇痠氧化酶(GO)是植物光呼吸途徑中的一種關鍵酶,可以催化乙醇痠生產乙醛痠.從新鮮菠菜葉中提取總RNA,利用RT-PCR技術穫得編碼GO基因的cDNA片斷.通過基因重組將GO基因剋隆到載體pAO815中,構建瞭胞內錶達載體pAO815/GO,重組質粒經電轉整閤至甲醇營養酵母GS115染色體. 在混閤碳源為10 g/L山梨醇和0.5 g/L甲醇的培養條件下,細胞的GO酶活達到 474 IU/g (DCW). 利用該重組畢赤酵母作為催化劑生產乙醛痠,結果錶明:在乙醇痠濃度為0.25 mol/L,重組酵母濕菌體為1O g/L,黃素單覈苷痠(FMN)濃度為0.01 mmol/L, pH 8.0,20 ℃,反應18 h後乙醛痠的產率達到51.8%.
을순산양화매(GO)시식물광호흡도경중적일충관건매,가이최화을순산생산을철산.종신선파채협중제취총RNA,이용RT-PCR기술획득편마GO기인적cDNA편단.통과기인중조장GO기인극륭도재체pAO815중,구건료포내표체재체pAO815/GO,중조질립경전전정합지갑순영양효모GS115염색체. 재혼합탄원위10 g/L산리순화0.5 g/L갑순적배양조건하,세포적GO매활체도 474 IU/g (DCW). 이용해중조필적효모작위최화제생산을철산,결과표명:재을순산농도위0.25 mol/L,중조효모습균체위1O g/L,황소단핵감산(FMN)농도위0.01 mmol/L, pH 8.0,20 ℃,반응18 h후을철산적산솔체도51.8%.
