中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2010年
10期
773-776
,共4页
杜鹃%宋永%刘立科%华荣虹
杜鵑%宋永%劉立科%華榮虹
두견%송영%류립과%화영홍
流行性乙型脑炎病毒%反转录环介导等温扩增技术
流行性乙型腦炎病毒%反轉錄環介導等溫擴增技術
류행성을형뇌염병독%반전록배개도등온확증기술
为建立一种简便、快速、灵敏、特异的乙型脑炎病毒(JEV)检测方法,本研究根据GenBank中登录的25株流行性JEV基因组序列,设计3对特异性的环介导等温扩增(LAMP)引物,优化反应体系,建立了一步法反转录-LAMP(RT-LAMP)检测方法.该方法检测时间短,灵敏度比常规RT-PCR方法高,可检测出103 TCID50/0.2 mL JEV;特异性强,对猪细小病毒、猪圆环病毒、伪狂犬病毒、猪瘟病毒等常见猪病毒均无交叉反应.结果判定时只需要在扩增产物中加入SYBRGreen Ⅰ染料,就可以直接在可见光或紫外光下观察颜色变化.该方法简便快捷,省时省力,是一种适用于基层实验室快速、准确检测流行性JEV的方法.
為建立一種簡便、快速、靈敏、特異的乙型腦炎病毒(JEV)檢測方法,本研究根據GenBank中登錄的25株流行性JEV基因組序列,設計3對特異性的環介導等溫擴增(LAMP)引物,優化反應體繫,建立瞭一步法反轉錄-LAMP(RT-LAMP)檢測方法.該方法檢測時間短,靈敏度比常規RT-PCR方法高,可檢測齣103 TCID50/0.2 mL JEV;特異性彊,對豬細小病毒、豬圓環病毒、偽狂犬病毒、豬瘟病毒等常見豬病毒均無交扠反應.結果判定時隻需要在擴增產物中加入SYBRGreen Ⅰ染料,就可以直接在可見光或紫外光下觀察顏色變化.該方法簡便快捷,省時省力,是一種適用于基層實驗室快速、準確檢測流行性JEV的方法.
위건립일충간편、쾌속、령민、특이적을형뇌염병독(JEV)검측방법,본연구근거GenBank중등록적25주류행성JEV기인조서렬,설계3대특이성적배개도등온확증(LAMP)인물,우화반응체계,건립료일보법반전록-LAMP(RT-LAMP)검측방법.해방법검측시간단,령민도비상규RT-PCR방법고,가검측출103 TCID50/0.2 mL JEV;특이성강,대저세소병독、저원배병독、위광견병독、저온병독등상견저병독균무교차반응.결과판정시지수요재확증산물중가입SYBRGreen Ⅰ염료,취가이직접재가견광혹자외광하관찰안색변화.해방법간편쾌첩,성시성력,시일충괄용우기층실험실쾌속、준학검측류행성JEV적방법.
