CAJ | 학술논문

为了研究海水鱼合成高度不饱和脂肪酸(Highly unsaturated fatty acids,HUFAs)的关键酶,本研究克隆了军曹鱼(Rachycentron canadum)的△6脂肪酸去饱和酶的部分cDNA序列.根据GenBank已公布的其他鱼类的△6脂肪酸去饱和酶cDNA序列进行分析,设计了一对用于PCR扩增军曹鱼的△6脂肪酸去饱和酶基因保守序列的引物;然后以军曹鱼肝总RNA为模板,通过RT-PCR的方法扩增出一段长度为743 bp的片段,该片段经纯化后,连接至pMD18-T载体上进行测序.结果显示,该片段与欧洲狼鲈(Dicentrarchus labrax)△6脂肪酸去饱和酶基因的覆盖区同源性为90.4%,该蛋白结构含有2个组氨酸保守区(HDFGH和HFQHH)和2个跨膜结构域,具有典型的△6脂肪酸去饱和酶结构特点.通过荧光定量PCR(Real-time quantity PCR,RTQ-PCR)检测该基因在军曹鱼幼鱼不同组织中的表达量,发现△6脂肪酸去饱和酶基因在军曹鱼脑的表达量最高;其次是肝;再其次是心、肠、脾、肾、鳃;而肌肉和皮肤的表达量相对较低,在脂肪组织中没有检测到△6去饱和酶基因的表达.结论为,军曹鱼具有合成HLIFAs的关键酶-△6脂肪酸去饱和酶,在其所有组织中以脑之含量最多.
위료연구해수어합성고도불포화지방산(Highly unsaturated fatty acids,HUFAs)적관건매,본연구극륭료군조어(Rachycentron canadum)적△6지방산거포화매적부분cDNA서렬.근거GenBank이공포적기타어류적△6지방산거포화매cDNA서렬진행분석,설계료일대용우PCR확증군조어적△6지방산거포화매기인보수서렬적인물;연후이군조어간총RNA위모판,통과RT-PCR적방법확증출일단장도위743 bp적편단,해편단경순화후,련접지pMD18-T재체상진행측서.결과현시,해편단여구주랑로(Dicentrarchus labrax)△6지방산거포화매기인적복개구동원성위90.4%,해단백결구함유2개조안산보수구(HDFGH화HFQHH)화2개과막결구역,구유전형적△6지방산거포화매결구특점.통과형광정량PCR(Real-time quantity PCR,RTQ-PCR)검측해기인재군조어유어불동조직중적표체량,발현△6지방산거포화매기인재군조어뇌적표체량최고;기차시간;재기차시심、장、비、신、새;이기육화피부적표체량상대교저,재지방조직중몰유검측도△6거포화매기인적표체.결론위,군조어구유합성HLIFAs적관건매-△6지방산거포화매,재기소유조직중이뇌지함량최다.