CAJ | 학술논문

目的:观察不成熟CD8α+树突状细胞(DC)体外经同种异基因白血病细胞全抗原冲击后的移植物抗白血病(GVL)效应.方法:C57BL/6(H-2b)小鼠的骨髓细胞以GM-CSF +IL-4 +SCF +Flt3L体外诱导不成熟CD8α+DC,第3 d加入0 mg/L、2.5 mg/L、5 mg/L、10 mg/L和20 mg/L BALB/c(H-2d)小鼠来源的同种异基因EL9611红白血病细胞抗原冲击,冲击后DC与同系(H-2b)T细胞按DC/T 1:1、2:1、4:1比例共培养,MTT法观察T细胞增殖情况,ELISA法检测上清中IFN-γ和IL-10的含量,LDH释放法检测T细胞对EL9611细胞的杀伤活性.以成熟DC为对照,观察同种异基因不成熟CD8α+DC体外对EL9611白血病细胞的GVL效应.结果:同种红白血病全抗原冲击后不成熟CD8α+DC可有效刺激同系T细胞增殖,作用随DC/T比例增加而增加,增殖效应在小剂量抗原(≤5 mg/L)冲击时更明显(P<0.05);Ag冲击后不成熟CD8α+DC刺激T细胞分泌IFN-γ和IL-10明显增高(P<0.05),IL-10的分泌与不成熟CD8α+DC发挥GVL效应存在一定的负相关关系,Ag冲击浓度较低而IL-10分泌少时,T细胞增殖活性较强.杀伤实验结果显示,白血病特异性T细胞对EL9611靶细胞的杀伤活性随抗原冲击浓度的增加而升高,浓度为2.5 mg/L时,杀伤率即可达90%,非特异性杀伤实验显示白血病特异性T细胞对同种异基因正常脾细胞的杀伤活性低于对照组(P<0.05),表明杀伤作用为抗原特异性杀伤,对正常细胞无明显杀伤.结论:经同种异基因白血病抗原冲击后不成熟CD8α+DC体外能刺激同系T细胞产生一定的GVL效应.
목적:관찰불성숙CD8α+수돌상세포(DC)체외경동충이기인백혈병세포전항원충격후적이식물항백혈병(GVL)효응.방법:C57BL/6(H-2b)소서적골수세포이GM-CSF +IL-4 +SCF +Flt3L체외유도불성숙CD8α+DC,제3 d가입0 mg/L、2.5 mg/L、5 mg/L、10 mg/L화20 mg/L BALB/c(H-2d)소서래원적동충이기인EL9611홍백혈병세포항원충격,충격후DC여동계(H-2b)T세포안DC/T 1:1、2:1、4:1비례공배양,MTT법관찰T세포증식정황,ELISA법검측상청중IFN-γ화IL-10적함량,LDH석방법검측T세포대EL9611세포적살상활성.이성숙DC위대조,관찰동충이기인불성숙CD8α+DC체외대EL9611백혈병세포적GVL효응.결과:동충홍백혈병전항원충격후불성숙CD8α+DC가유효자격동계T세포증식,작용수DC/T비례증가이증가,증식효응재소제량항원(≤5 mg/L)충격시경명현(P<0.05);Ag충격후불성숙CD8α+DC자격T세포분비IFN-γ화IL-10명현증고(P<0.05),IL-10적분비여불성숙CD8α+DC발휘GVL효응존재일정적부상관관계,Ag충격농도교저이IL-10분비소시,T세포증식활성교강.살상실험결과현시,백혈병특이성T세포대EL9611파세포적살상활성수항원충격농도적증가이승고,농도위2.5 mg/L시,살상솔즉가체90%,비특이성살상실험현시백혈병특이성T세포대동충이기인정상비세포적살상활성저우대조조(P<0.05),표명살상작용위항원특이성살상,대정상세포무명현살상.결론:경동충이기인백혈병항원충격후불성숙CD8α+DC체외능자격동계T세포산생일정적GVL효응.