中国医学科学院学报
中國醫學科學院學報
중국의학과학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE SINICAE
2011年
4期
351-356
,共6页
苏林%孔燕%刘长征%杨克恭%陈松森
囌林%孔燕%劉長徵%楊剋恭%陳鬆森
소림%공연%류장정%양극공%진송삼
噬菌体表面展示文库%人干细胞因子%模拟肽%筛选%酶联免疫吸附测定法
噬菌體錶麵展示文庫%人榦細胞因子%模擬肽%篩選%酶聯免疫吸附測定法
서균체표면전시문고%인간세포인자%모의태%사선%매련면역흡부측정법
目的 用噬菌体表面展示文库筛选具有人干细胞因子(hSCF)生物学活性的模拟肽.方法 采用酶联免疫吸附测定法(EUSA)从噬菌体环七肽库和十二肽库筛选与重组hSCF受体(rc-kit/Ig1-3)有较高亲和力的噬菌体克隆,提取噬菌体单链DNA进行序列测定,根据序列测定结果合成阳性小肽,四甲基偶氮噻唑盐(MTT)法检测合成小肽刺激UT-7细胞增殖的活性.结果 经3轮筛选获得11个来源于环七肽库和8个来源于十二肽库与rc-kit/Ig1-3结合活性较高的噬菌体克隆,DNA测序结果显示环七肽库筛选到1个共有序列DPSSPHTH,十二肽库没有筛选到共有序列.序列比对分析显示,这些小肽与hSCF没有同源序列.MTT法测定结果表明,合成的4个小肽均能促进UT-7细胞增殖,其中CE16和LE20刺激效果明显.结论 获得4个具有较高hSCF生物学活性的模拟肽.
目的 用噬菌體錶麵展示文庫篩選具有人榦細胞因子(hSCF)生物學活性的模擬肽.方法 採用酶聯免疫吸附測定法(EUSA)從噬菌體環七肽庫和十二肽庫篩選與重組hSCF受體(rc-kit/Ig1-3)有較高親和力的噬菌體剋隆,提取噬菌體單鏈DNA進行序列測定,根據序列測定結果閤成暘性小肽,四甲基偶氮噻唑鹽(MTT)法檢測閤成小肽刺激UT-7細胞增殖的活性.結果 經3輪篩選穫得11箇來源于環七肽庫和8箇來源于十二肽庫與rc-kit/Ig1-3結閤活性較高的噬菌體剋隆,DNA測序結果顯示環七肽庫篩選到1箇共有序列DPSSPHTH,十二肽庫沒有篩選到共有序列.序列比對分析顯示,這些小肽與hSCF沒有同源序列.MTT法測定結果錶明,閤成的4箇小肽均能促進UT-7細胞增殖,其中CE16和LE20刺激效果明顯.結論 穫得4箇具有較高hSCF生物學活性的模擬肽.
목적 용서균체표면전시문고사선구유인간세포인자(hSCF)생물학활성적모의태.방법 채용매련면역흡부측정법(EUSA)종서균체배칠태고화십이태고사선여중조hSCF수체(rc-kit/Ig1-3)유교고친화력적서균체극륭,제취서균체단련DNA진행서렬측정,근거서렬측정결과합성양성소태,사갑기우담새서염(MTT)법검측합성소태자격UT-7세포증식적활성.결과 경3륜사선획득11개래원우배칠태고화8개래원우십이태고여rc-kit/Ig1-3결합활성교고적서균체극륭,DNA측서결과현시배칠태고사선도1개공유서렬DPSSPHTH,십이태고몰유사선도공유서렬.서렬비대분석현시,저사소태여hSCF몰유동원서렬.MTT법측정결과표명,합성적4개소태균능촉진UT-7세포증식,기중CE16화LE20자격효과명현.결론 획득4개구유교고hSCF생물학활성적모의태.
