CAJ | 학술논문

目的研究临床依赖利福平结核分枝杆菌(依R菌)相关蛋白的氨基酸及其编码基因序列.方法以罗氏绝对浓度法药敏实验鉴定临床依R菌株(49株)、耐R菌株(54株)和R敏感菌株(30株),用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺电泳(SDS-PAGE)法对不同临床菌株及H37Rv标准株共计134株菌株的菌体蛋白质图谱进行比较分析,通过Q-TOF2型毛细管液相色谱-电喷雾-四极杆-飞行时间串联质谱仪(LC-ESI-MS-MS) 对其差异表达蛋白的氨基酸序列进行鉴定,并用对其蛋白的编码基因进行DNA序列分析.结果不同菌株的SDS-PAGE菌体蛋白图谱基本相似.49株依R菌有41株(84%)在含R管中的菌体蛋白图谱有一条相同的高表达蛋白带(相对于标准物分子质量43 000的下端),约占总菌体蛋白的30%～50%,H37Rv标准株、28株R敏感菌(28/30)及44株耐R菌(44/54)的含R管和对照管的蛋白图谱相似,且无相应的高表达现象;该高表达蛋白经氨基酸序列鉴定为结核分枝杆菌H37Rv假设蛋白Rv0341,相对分子质量为43 894,等电点(PI)5.25,得分183.不同菌株的Rv0341编码基因1 440 bp扩增片段,经DNA测序分析均未发现突变.结论利福平对 Rv0341在依R菌中的表达有上调作用,Rv0341与依R菌相关,可视为依R菌的相关蛋白或标志物;Rv0341与依R菌的毒力及细胞壁的合成是否相关有进一步的研究价值.
목적연구림상의뢰리복평결핵분지간균(의R균)상관단백적안기산급기편마기인서렬.방법이라씨절대농도법약민실험감정림상의R균주(49주)、내R균주(54주)화R민감균주(30주),용십이완기류산납-취병희선알전영(SDS-PAGE)법대불동림상균주급H37Rv표준주공계134주균주적균체단백질도보진행비교분석,통과Q-TOF2형모세관액상색보-전분무-사겁간-비행시간천련질보의(LC-ESI-MS-MS) 대기차이표체단백적안기산서렬진행감정,병용대기단백적편마기인진행DNA서렬분석.결과불동균주적SDS-PAGE균체단백도보기본상사.49주의R균유41주(84%)재함R관중적균체단백도보유일조상동적고표체단백대(상대우표준물분자질량43 000적하단),약점총균체단백적30%～50%,H37Rv표준주、28주R민감균(28/30)급44주내R균(44/54)적함R관화대조관적단백도보상사,차무상응적고표체현상;해고표체단백경안기산서렬감정위결핵분지간균H37Rv가설단백Rv0341,상대분자질량위43 894,등전점(PI)5.25,득분183.불동균주적Rv0341편마기인1 440 bp확증편단,경DNA측서분석균미발현돌변.결론리복평대 Rv0341재의R균중적표체유상조작용,Rv0341여의R균상관,가시위의R균적상관단백혹표지물;Rv0341여의R균적독력급세포벽적합성시부상관유진일보적연구개치.