中华肝脏病杂志
中華肝髒病雜誌
중화간장병잡지
CHINESE JOURNAL OF HEPATOLOGY
2004年
1期
35-37
,共3页
龚邦东%罗文%杜芳腾%叶如美%刘晶美%余春根%邹叶青%张吉翔
龔邦東%囉文%杜芳騰%葉如美%劉晶美%餘春根%鄒葉青%張吉翔
공방동%라문%두방등%협여미%류정미%여춘근%추협청%장길상
癌,肝细胞%血管内皮生长因子%反义寡核苷酸%帽子结构
癌,肝細胞%血管內皮生長因子%反義寡覈苷痠%帽子結構
암,간세포%혈관내피생장인자%반의과핵감산%모자결구
目的探讨不同序列的反义寡核苷酸对肝癌细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达的抑制效果. 方法 SMMC7721细胞于正常氧和缺氧条件下培养24h,观察缺氧对VEGF mRNA表达的影响;SMMC7721细胞接种于6孔板后,各加入不同的反义寡核苷酸(反帽子结构A06513、反翻译起始部位A06514、反第三外显子A06515、反翻译终止部位A06516和空白组),缺氧培养24h,然后收集细胞提取总RNA并作逆转录聚合酶链反应分析,同时以管家基因GAPDH(3-磷酸甘油醛脱氢酶)表达为内对照. 结果缺氧条件下,SMMC7721细胞VEGF mRNA表达明显增强,而有氧条件下未见表达;反义寡核苷酸具有明显抑制VEGF mRNA表达,和空白对照组相比,A06513、A06514、A06515及A06516的VEGF/GAPDH值分别为0.49±0.08、0.71±0.12、0.72±0.11及0.86±0.12(F＝12.21,P<0.05).帽子结构的反义基因表现最强的抑制作用(P<0.01). 结论与VEGF帽子结构作用的反义寡核苷酸,有望成为肝癌反义基因治疗的新选择.
目的探討不同序列的反義寡覈苷痠對肝癌細胞血管內皮生長因子(VEGF)錶達的抑製效果. 方法 SMMC7721細胞于正常氧和缺氧條件下培養24h,觀察缺氧對VEGF mRNA錶達的影響;SMMC7721細胞接種于6孔闆後,各加入不同的反義寡覈苷痠(反帽子結構A06513、反翻譯起始部位A06514、反第三外顯子A06515、反翻譯終止部位A06516和空白組),缺氧培養24h,然後收集細胞提取總RNA併作逆轉錄聚閤酶鏈反應分析,同時以管傢基因GAPDH(3-燐痠甘油醛脫氫酶)錶達為內對照. 結果缺氧條件下,SMMC7721細胞VEGF mRNA錶達明顯增彊,而有氧條件下未見錶達;反義寡覈苷痠具有明顯抑製VEGF mRNA錶達,和空白對照組相比,A06513、A06514、A06515及A06516的VEGF/GAPDH值分彆為0.49±0.08、0.71±0.12、0.72±0.11及0.86±0.12(F＝12.21,P<0.05).帽子結構的反義基因錶現最彊的抑製作用(P<0.01). 結論與VEGF帽子結構作用的反義寡覈苷痠,有望成為肝癌反義基因治療的新選擇.
목적탐토불동서렬적반의과핵감산대간암세포혈관내피생장인자(VEGF)표체적억제효과. 방법 SMMC7721세포우정상양화결양조건하배양24h,관찰결양대VEGF mRNA표체적영향;SMMC7721세포접충우6공판후,각가입불동적반의과핵감산(반모자결구A06513、반번역기시부위A06514、반제삼외현자A06515、반번역종지부위A06516화공백조),결양배양24h,연후수집세포제취총RNA병작역전록취합매련반응분석,동시이관가기인GAPDH(3-린산감유철탈경매)표체위내대조. 결과결양조건하,SMMC7721세포VEGF mRNA표체명현증강,이유양조건하미견표체;반의과핵감산구유명현억제VEGF mRNA표체,화공백대조조상비,A06513、A06514、A06515급A06516적VEGF/GAPDH치분별위0.49±0.08、0.71±0.12、0.72±0.11급0.86±0.12(F＝12.21,P<0.05).모자결구적반의기인표현최강적억제작용(P<0.01). 결론여VEGF모자결구작용적반의과핵감산,유망성위간암반의기인치료적신선택.
