军事医学科学院院刊
軍事醫學科學院院刊
군사의학과학원원간
BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES
2005年
1期
38-40,44
,共4页
王剑%张莉%毛春明%程萱%侯宁%吕娅歆%杨晓
王劍%張莉%毛春明%程萱%侯寧%呂婭歆%楊曉
왕검%장리%모춘명%정훤%후저%려아흠%양효
心脏%Cre重组酶%小鼠,转基因%组织特异性
心髒%Cre重組酶%小鼠,轉基因%組織特異性
심장%Cre중조매%소서,전기인%조직특이성
目的:建立在小鼠心肌细胞中特异性表达Cre重组酶的转基因小鼠.方法:构建了心肌细胞特异性表达Cre重组酶的转基因载体.该载体通过显微注射被导入小鼠受精卵中,通过胚胎移植,获得转基因首建者小鼠.利用PCR检测子代小鼠Cre重组酶整合情况.通过Northern 杂交检测Cre重组酶表达的组织特异性.结果:构建了含有心肌细胞特异性α-肌球蛋白重链(α-MHC)启动子、Cre重组酶基因和人生长激素基因polyA的转基因载体α-MHC-Cre-hGH.将转基因载体进行显微注射,共注射了215枚小鼠受精卵,其中202枚移植入13只假孕母鼠的输卵管中发育,获得子代小鼠42只.PCR检测发现有1只小鼠在其基因组上整合有Cre重组酶基因.Northern杂交检测结果显示该转基因小鼠只在心脏组织中特异性地表达Cre重组酶基因.结论:成功获得了在小鼠心肌细胞中特异性表达Cre重组酶的转基因小鼠,为利用条件基因打靶技术研究基因在心脏发育与相关疾病中的功能提供了有利的工具.
目的:建立在小鼠心肌細胞中特異性錶達Cre重組酶的轉基因小鼠.方法:構建瞭心肌細胞特異性錶達Cre重組酶的轉基因載體.該載體通過顯微註射被導入小鼠受精卵中,通過胚胎移植,穫得轉基因首建者小鼠.利用PCR檢測子代小鼠Cre重組酶整閤情況.通過Northern 雜交檢測Cre重組酶錶達的組織特異性.結果:構建瞭含有心肌細胞特異性α-肌毬蛋白重鏈(α-MHC)啟動子、Cre重組酶基因和人生長激素基因polyA的轉基因載體α-MHC-Cre-hGH.將轉基因載體進行顯微註射,共註射瞭215枚小鼠受精卵,其中202枚移植入13隻假孕母鼠的輸卵管中髮育,穫得子代小鼠42隻.PCR檢測髮現有1隻小鼠在其基因組上整閤有Cre重組酶基因.Northern雜交檢測結果顯示該轉基因小鼠隻在心髒組織中特異性地錶達Cre重組酶基因.結論:成功穫得瞭在小鼠心肌細胞中特異性錶達Cre重組酶的轉基因小鼠,為利用條件基因打靶技術研究基因在心髒髮育與相關疾病中的功能提供瞭有利的工具.
목적:건립재소서심기세포중특이성표체Cre중조매적전기인소서.방법:구건료심기세포특이성표체Cre중조매적전기인재체.해재체통과현미주사피도입소서수정란중,통과배태이식,획득전기인수건자소서.이용PCR검측자대소서Cre중조매정합정황.통과Northern 잡교검측Cre중조매표체적조직특이성.결과:구건료함유심기세포특이성α-기구단백중련(α-MHC)계동자、Cre중조매기인화인생장격소기인polyA적전기인재체α-MHC-Cre-hGH.장전기인재체진행현미주사,공주사료215매소서수정란,기중202매이식입13지가잉모서적수란관중발육,획득자대소서42지.PCR검측발현유1지소서재기기인조상정합유Cre중조매기인.Northern잡교검측결과현시해전기인소서지재심장조직중특이성지표체Cre중조매기인.결론:성공획득료재소서심기세포중특이성표체Cre중조매적전기인소서,위이용조건기인타파기술연구기인재심장발육여상관질병중적공능제공료유리적공구.
