诱导胚胎干细胞向角膜上皮细胞分化的实验研
유도배태간세포향각막상피세포분화적실험연
  • 万方数据
    中国科学C辑 중국과학C집
    SCIENCE IN CHINA (SERIES C)
    2005年 2期 164-171 ,共8页

    王智崇%葛坚%黄冰%高前应%刘炳乾%王凌华%喻瓴%范志刚%路晓明%刘敬波

    왕지숭%갈견%황빙%고전응%류병건%왕릉화%유령%범지강%로효명%류경파

    胚胎干细胞%角膜上皮细胞%诱导分化%微环境%表层角膜基质 胚胎榦細胞%角膜上皮細胞%誘導分化%微環境%錶層角膜基質
    배태간세포%각막상피세포%유도분화%미배경%표층각막기질
    探索胚胎干细胞在表层角膜缘基质诱导下向角膜上皮细胞分化的可能性. 体外培养带GFP标记的 ES-D3细胞, 并利用视黄酸进行预诱导, 然后将预诱导后的细胞接种在表层角膜缘基质上, 细胞融合形成单层后, 随机分为3组进行研究: 第1组传代后直接进行检测; 第2组在气-液界面上培养10天, 然后植入裸鼠皮下以进行体内诱导; 第3组作为对照组, 不给予GFP-ES-D3细胞特殊诱导条件, 细胞自由分化. 诱导分化的细胞植入裸鼠皮下体2周后没有畸胎瘤形成. 诱导分化的细胞呈现上皮样外观, 体内诱导组和体外诱导组免疫组织化学染色均检测到CK3, P63和PCNA表达阳性, 电子显微镜检查可见两组细胞表面都有微绒毛和细胞间紧密连接形成. 实验对照组部分细胞脱落和死亡, 大部分表现神经样细胞的树突样外观, 小部分未死亡的贴壁细胞呈多态性, 这些结果表明胚胎干细胞在特定条件下经表层角膜基质诱导能够分化为角膜上皮细胞. 胚胎干细胞诱导分化有可能为眼表重建和组织工程化角膜的构建提供上皮种子细胞.
    탐색배태간세포재표층각막연기질유도하향각막상피세포분화적가능성. 체외배양대GFP표기적 ES-D3세포, 병이용시황산진행예유도, 연후장예유도후적세포접충재표층각막연기질상, 세포융합형성단층후, 수궤분위3조진행연구: 제1조전대후직접진행검측; 제2조재기-액계면상배양10천, 연후식입라서피하이진행체내유도; 제3조작위대조조, 불급여GFP-ES-D3세포특수유도조건, 세포자유분화. 유도분화적세포식입라서피하체2주후몰유기태류형성. 유도분화적세포정현상피양외관, 체내유도조화체외유도조면역조직화학염색균검측도CK3, P63화PCNA표체양성, 전자현미경검사가견량조세포표면도유미융모화세포간긴밀련접형성. 실험대조조부분세포탈락화사망, 대부분표현신경양세포적수돌양외관, 소부분미사망적첩벽세포정다태성, 저사결과표명배태간세포재특정조건하경표층각막기질유도능구분화위각막상피세포. 배태간세포유도분화유가능위안표중건화조직공정화각막적구건제공상피충자세포.
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