CAJ | 학술논문

目的探索用半自动胰腺消化系统建立大规模人胰岛细胞纯化的可靠方法.方法使用自制的半自动人胰腺消化分离装置及胶原酶P进行人胰腺的消化分离,用COBE2991细胞分离机及HCA-Ficoll纯化人胰岛细胞.通过DTZ染色,在倒置显微镜下计数胰岛细胞的数量和纯度,用胰岛素释放试验检测胰岛细胞的分泌功能.结果消化后平均每条胰腺可平均获得(38 6201±78 219)个胰岛细胞当量(IEQ),纯化后平均每条胰腺可获得231 420±28 054IEQ,平均每克胰腺组织可获得(3148±317)IEQ,纯化后胰岛细胞平均纯度为(62.81±2.68)%.纯化后的胰岛细胞对胰岛素释放刺激反应良好,高糖(16.7 mmol/L)时胰岛素的释放量为低糖(3.3 mmol/L)时的3.53倍(P≤0.001).结论成功建立了半自动人胰岛细胞分离、纯化的方法,纯化的人胰岛细胞具有良好的生物活性.
목적 탐색용반자동이선소화계통건립대규모인이도세포순화적가고방법.방법 사용자제적반자동인이선소화분리장치급효원매P진행인이선적소화분리,용COBE2991세포분리궤급HCA-Ficoll순화인이도세포.통과DTZ염색,재도치현미경하계수이도세포적수량화순도,용이도소석방시험검측이도세포적분비공능.결과 소화후평균매조이선가평균획득(38 6201±78 219)개이도세포당량(IEQ),순화후평균매조이선가획득231 420±28 054IEQ,평균매극이선조직가획득(3148±317)IEQ,순화후이도세포평균순도위(62.81±2.68)%.순화후적이도세포대이도소석방자격반응량호,고당(16.7 mmol/L)시이도소적석방량위저당(3.3 mmol/L)시적3.53배(P≤0.001).결론 성공건립료반자동인이도세포분리、순화적방법,순화적인이도세포구유량호적생물활성.