CAJ | 학술논문

目的:采用新生牛皮提取胶原蛋白、制备生物医用胶原蛋白海绵,观察其生物学活性与细胞相容性.方法:实验于2006-05/2007-02在西北民族大学生命科学与工程学院生物工程与技术国家民委重点实验室完成.实验方法:①取出生24 h内宰杀的新生尕里巴牛犊皮制备胶原蛋白海绵.②将新生牛皮胶原蛋白海绵与黑裘皮羔羊肾F3代成纤维细胞混悬液共培养,分别设胶原海绵材料组、阴性对照组(生理盐水)、阳性对照组(橡胶塞浸提液).实验评估:①应用倒置相差显微镜观察细胞形态.②培养20,35 d对细胞与胶原蛋白海绵共培养物进行AO染色观察细胞在胶原海绵中的增殖情况.③培养65 d后制石蜡切片,行苏木精-伊红染色观察细胞在胶原海绵中的生长情况.结果:①细胞形态观察结果:阳性对照组细胞培养24 h细胞圆缩,不贴壁,3 d后全部死亡.胶原海绵材料组与阴性对照组细胞形态均正常,细胞贴壁生长良好.随着培养时间的延长,海绵孔隙逐渐变小,细胞数量增加,形态变小,海绵外观从柔软、混浊变得挺拔、透明.②细胞在胶原海绵中的增殖情况:吖啶橙-AO染色显示培养20,35 d胶原海绵-羔羊肾成纤维细胞共培养物中有大量细胞存在,并且在胶原蛋白空隙中有大量细胞成团簇状生长.③细胞在胶原海绵中的生长情况:苏木精-伊红染色显示有大量蓝色细胞核和新生的红色胶原纤维.结论:制备的新生牛皮胶原蛋白海绵对岷县黑裘皮羔羊肾成纤维细胞有良好的生物相容性,无细胞毒性.
목적:채용신생우피제취효원단백、제비생물의용효원단백해면,관찰기생물학활성여세포상용성.방법:실험우2006-05/2007-02재서북민족대학생명과학여공정학원생물공정여기술국가민위중점실험실완성.실험방법:①취출생24 h내재살적신생소리파우독피제비효원단백해면.②장신생우피효원단백해면여흑구피고양신F3대성섬유세포혼현액공배양,분별설효원해면재료조、음성대조조(생리염수)、양성대조조(상효새침제액).실험평고:①응용도치상차현미경관찰세포형태.②배양20,35 d대세포여효원단백해면공배양물진행AO염색관찰세포재효원해면중적증식정황.③배양65 d후제석사절편,행소목정-이홍염색관찰세포재효원해면중적생장정황.결과:①세포형태관찰결과:양성대조조세포배양24 h세포원축,불첩벽,3 d후전부사망.효원해면재료조여음성대조조세포형태균정상,세포첩벽생장량호.수착배양시간적연장,해면공극축점변소,세포수량증가,형태변소,해면외관종유연、혼탁변득정발、투명.②세포재효원해면중적증식정황:아정등-AO염색현시배양20,35 d효원해면-고양신성섬유세포공배양물중유대량세포존재,병차재효원단백공극중유대량세포성단족상생장.③세포재효원해면중적생장정황:소목정-이홍염색현시유대량람색세포핵화신생적홍색효원섬유.결론:제비적신생우피효원단백해면대민현흑구피고양신성섬유세포유량호적생물상용성,무세포독성.