中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2008年
9期
1699-1703
,共5页
赵岐刚%司磊%田小侠%李鹏
趙岐剛%司磊%田小俠%李鵬
조기강%사뢰%전소협%리붕
基因,survivin%肺肿瘤%A549细胞%基因疗法
基因,survivin%肺腫瘤%A549細胞%基因療法
기인,survivin%폐종류%A549세포%기인요법
目的:探讨慢病毒载体介导survivin siRNA对人肺腺癌A549细胞增殖的影响及其作用机制,为肺癌基因治疗新策略提供帮助.方法:构建表达survivin-siRNA的慢病毒载体感染A549细胞株,测定病毒滴度.采用RT-PCR、免疫组化及Western blotting等检测感染后不同分组A549细胞survivin-mRNA和蛋白的变化及eagpase-3蛋白的变化,通过流式细胞仪及MTT法检测感染后A549细胞周期及生长曲线.结果:RT-PCR及Western blotting检测显示,转染细胞(MOI=150)中survivin基因mRNA和蛋白的表达明显降低,抑制率分别为97%、88%;细胞生长曲线和周期结果显示转染组细胞增殖明显减慢,G.期细胞比例明显增加,S期细胞比例则明显减少;转染细胞中caapaae-3被激活.结论:慢病毒载体介导的siRNA能有效抑制人肺腺癌A549细胞 survivin基因的表达和细胞增殖,有效激发细胞凋亡,有望成为肺腺癌基因治疗的新策略之一.
目的:探討慢病毒載體介導survivin siRNA對人肺腺癌A549細胞增殖的影響及其作用機製,為肺癌基因治療新策略提供幫助.方法:構建錶達survivin-siRNA的慢病毒載體感染A549細胞株,測定病毒滴度.採用RT-PCR、免疫組化及Western blotting等檢測感染後不同分組A549細胞survivin-mRNA和蛋白的變化及eagpase-3蛋白的變化,通過流式細胞儀及MTT法檢測感染後A549細胞週期及生長麯線.結果:RT-PCR及Western blotting檢測顯示,轉染細胞(MOI=150)中survivin基因mRNA和蛋白的錶達明顯降低,抑製率分彆為97%、88%;細胞生長麯線和週期結果顯示轉染組細胞增殖明顯減慢,G.期細胞比例明顯增加,S期細胞比例則明顯減少;轉染細胞中caapaae-3被激活.結論:慢病毒載體介導的siRNA能有效抑製人肺腺癌A549細胞 survivin基因的錶達和細胞增殖,有效激髮細胞凋亡,有望成為肺腺癌基因治療的新策略之一.
목적:탐토만병독재체개도survivin siRNA대인폐선암A549세포증식적영향급기작용궤제,위폐암기인치료신책략제공방조.방법:구건표체survivin-siRNA적만병독재체감염A549세포주,측정병독적도.채용RT-PCR、면역조화급Western blotting등검측감염후불동분조A549세포survivin-mRNA화단백적변화급eagpase-3단백적변화,통과류식세포의급MTT법검측감염후A549세포주기급생장곡선.결과:RT-PCR급Western blotting검측현시,전염세포(MOI=150)중survivin기인mRNA화단백적표체명현강저,억제솔분별위97%、88%;세포생장곡선화주기결과현시전염조세포증식명현감만,G.기세포비례명현증가,S기세포비례칙명현감소;전염세포중caapaae-3피격활.결론:만병독재체개도적siRNA능유효억제인폐선암A549세포 survivin기인적표체화세포증식,유효격발세포조망,유망성위폐선암기인치료적신책략지일.