中华骨科杂志
中華骨科雜誌
중화골과잡지
CHINESE JOURNAL OF ORTHOPAEDICS
2006年
10期
690-694
,共5页
杨惠林%耿德春%王骏骅%徐耀增%陈亮%唐天驷
楊惠林%耿德春%王駿驊%徐耀增%陳亮%唐天駟
양혜림%경덕춘%왕준화%서요증%진량%당천사
脂肪组织%干细胞%细胞分化%成骨细胞%软骨细胞
脂肪組織%榦細胞%細胞分化%成骨細胞%軟骨細胞
지방조직%간세포%세포분화%성골세포%연골세포
目的 研究脂肪基质干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)分离培养的方法,探讨大鼠ADSCs在体外向成骨细胞、软骨细胞分化的能力.方法 从成年SD大鼠腹股沟处无菌获取脂肪组织,胶原酶消化分离,培养出ADSCs.基础培养基传至第二代时改换诱导培养基,分别诱导向成骨、软骨细胞分化,培养2～4周,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、Von kossa染色鉴定向成骨细胞分化能力;阿新蓝染色鉴定向软骨细胞分化能力.RT-PCR检测成骨细胞、软骨细胞标志基因.结果 大鼠脂肪能够分离培养出生长旺盛的ADSCs;向成骨细胞诱导,ALP、Von kossa染色阳性,RT-PCR检测有ALP、Osteocalcin及Osteopontin表达;向软骨细胞诱导,阿新蓝染色阳性,RT-PCR检测有Ⅱ型胶原、Ⅹ型胶原和Aggrecan表达.结论 大鼠脂肪组织可以分离培养出ADSCs,生物学特性与骨髓基质干细胞(mesenchvmal stem cells,MSCs)相似,能够向成骨细胞、软骨细胞分化,有希望成为组织工程理想的种子细胞来源.
目的 研究脂肪基質榦細胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)分離培養的方法,探討大鼠ADSCs在體外嚮成骨細胞、軟骨細胞分化的能力.方法 從成年SD大鼠腹股溝處無菌穫取脂肪組織,膠原酶消化分離,培養齣ADSCs.基礎培養基傳至第二代時改換誘導培養基,分彆誘導嚮成骨、軟骨細胞分化,培養2～4週,堿性燐痠酶(alkaline phosphatase,ALP)、Von kossa染色鑒定嚮成骨細胞分化能力;阿新藍染色鑒定嚮軟骨細胞分化能力.RT-PCR檢測成骨細胞、軟骨細胞標誌基因.結果 大鼠脂肪能夠分離培養齣生長旺盛的ADSCs;嚮成骨細胞誘導,ALP、Von kossa染色暘性,RT-PCR檢測有ALP、Osteocalcin及Osteopontin錶達;嚮軟骨細胞誘導,阿新藍染色暘性,RT-PCR檢測有Ⅱ型膠原、Ⅹ型膠原和Aggrecan錶達.結論 大鼠脂肪組織可以分離培養齣ADSCs,生物學特性與骨髓基質榦細胞(mesenchvmal stem cells,MSCs)相似,能夠嚮成骨細胞、軟骨細胞分化,有希望成為組織工程理想的種子細胞來源.
목적 연구지방기질간세포(adipose-derived stem cells,ADSCs)분리배양적방법,탐토대서ADSCs재체외향성골세포、연골세포분화적능력.방법 종성년SD대서복고구처무균획취지방조직,효원매소화분리,배양출ADSCs.기출배양기전지제이대시개환유도배양기,분별유도향성골、연골세포분화,배양2～4주,감성린산매(alkaline phosphatase,ALP)、Von kossa염색감정향성골세포분화능력;아신람염색감정향연골세포분화능력.RT-PCR검측성골세포、연골세포표지기인.결과 대서지방능구분리배양출생장왕성적ADSCs;향성골세포유도,ALP、Von kossa염색양성,RT-PCR검측유ALP、Osteocalcin급Osteopontin표체;향연골세포유도,아신람염색양성,RT-PCR검측유Ⅱ형효원、Ⅹ형효원화Aggrecan표체.결론 대서지방조직가이분리배양출ADSCs,생물학특성여골수기질간세포(mesenchvmal stem cells,MSCs)상사,능구향성골세포、연골세포분화,유희망성위조직공정이상적충자세포래원.
