诊断学理论与实践
診斷學理論與實踐
진단학이론여실천
JOURNAL OF DIAGNOSTICS CONCEPTS & PRACTICE
2002年
2期
84-87
,共4页
倪培华%项佑贵%吴洁敏%陈铭生
倪培華%項祐貴%吳潔敏%陳銘生
예배화%항우귀%오길민%진명생
脂蛋白脂酶%基因突变%基因多态性%单链构象多态性
脂蛋白脂酶%基因突變%基因多態性%單鏈構象多態性
지단백지매%기인돌변%기인다태성%단련구상다태성
目的:建立聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)技术检测脂蛋白脂酶(LPL)基因Hind III多态性、Ser447Ter多态性及-93T/G基因突变的方法.方法:5 μl Hind III多态性或-93T/G基因突变的PCR产物和5 μl甲酰胺变性液混匀变性,室温下用8%的聚丙烯酰胺凝胶电泳后银染.5 μl Ser447Ter多态性的PCR产物和2 μl甲酰胺变性液混匀变性,25℃左右用8%的聚丙烯酰胺凝胶电泳后银染.结果:PCR-SSCP成功检出LPL的Hind III多态性、Ser447Ter多态性及-93T/G基因突变, 并检出第9 内含子50位一个G碱基缺失和启动子区域-85位一个C→T碱基置换即-85C/T.同时PCR-RFLP验证了200例标本的PCR-SSCP检测结果,两种方法检测已知基因变异时的结果完全一致.结论:PCR-SSCP法既能检测已知的LPL基因变异,也可检出未知的LPL基因变异,是临床实验室开展基因诊断的一种简便、有效的方法.
目的:建立聚閤酶鏈反應-單鏈構象多態性(PCR-SSCP)技術檢測脂蛋白脂酶(LPL)基因Hind III多態性、Ser447Ter多態性及-93T/G基因突變的方法.方法:5 μl Hind III多態性或-93T/G基因突變的PCR產物和5 μl甲酰胺變性液混勻變性,室溫下用8%的聚丙烯酰胺凝膠電泳後銀染.5 μl Ser447Ter多態性的PCR產物和2 μl甲酰胺變性液混勻變性,25℃左右用8%的聚丙烯酰胺凝膠電泳後銀染.結果:PCR-SSCP成功檢齣LPL的Hind III多態性、Ser447Ter多態性及-93T/G基因突變, 併檢齣第9 內含子50位一箇G堿基缺失和啟動子區域-85位一箇C→T堿基置換即-85C/T.同時PCR-RFLP驗證瞭200例標本的PCR-SSCP檢測結果,兩種方法檢測已知基因變異時的結果完全一緻.結論:PCR-SSCP法既能檢測已知的LPL基因變異,也可檢齣未知的LPL基因變異,是臨床實驗室開展基因診斷的一種簡便、有效的方法.
목적:건립취합매련반응-단련구상다태성(PCR-SSCP)기술검측지단백지매(LPL)기인Hind III다태성、Ser447Ter다태성급-93T/G기인돌변적방법.방법:5 μl Hind III다태성혹-93T/G기인돌변적PCR산물화5 μl갑선알변성액혼균변성,실온하용8%적취병희선알응효전영후은염.5 μl Ser447Ter다태성적PCR산물화2 μl갑선알변성액혼균변성,25℃좌우용8%적취병희선알응효전영후은염.결과:PCR-SSCP성공검출LPL적Hind III다태성、Ser447Ter다태성급-93T/G기인돌변, 병검출제9 내함자50위일개G감기결실화계동자구역-85위일개C→T감기치환즉-85C/T.동시PCR-RFLP험증료200례표본적PCR-SSCP검측결과,량충방법검측이지기인변이시적결과완전일치.결론:PCR-SSCP법기능검측이지적LPL기인변이,야가검출미지적LPL기인변이,시림상실험실개전기인진단적일충간편、유효적방법.
