西南农业大学学报(自然科学版)
西南農業大學學報(自然科學版)
서남농업대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF SOUTHWEST AGRICULTURAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE)
2004年
2期
148-150,154
,共4页
孙宪昀%王中康%周常勇%夏玉先
孫憲昀%王中康%週常勇%夏玉先
손헌윤%왕중강%주상용%하옥선
制样技术%浸泡%PCR%柑桔溃疡病
製樣技術%浸泡%PCR%柑桔潰瘍病
제양기술%침포%PCR%감길궤양병
采用依据柑桔溃疡病菌独有蛋白基因的保守区段设计的特异性引物及其扩增体系进行测试.4种浸泡液中,浸泡液B的浸提效果最好,最佳浸泡时间为10～15 min.浸提液进行加热灭活与不加热灭活处理,PCR扩增结果无明显差异.对于无症柑桔样品,浸泡液中加入终浓度为0.3%的Na2SO3可以降低植物色素、多元酚和铜制剂残留的Cu2+等抑制PCR反应物质的干扰作用.样品浸提液经过离心处理,不仅可以有效浓缩靶细菌,提高检测灵敏度,而且可以除去PCR反应抑制物质,大大降低了检测的假阴性.
採用依據柑桔潰瘍病菌獨有蛋白基因的保守區段設計的特異性引物及其擴增體繫進行測試.4種浸泡液中,浸泡液B的浸提效果最好,最佳浸泡時間為10～15 min.浸提液進行加熱滅活與不加熱滅活處理,PCR擴增結果無明顯差異.對于無癥柑桔樣品,浸泡液中加入終濃度為0.3%的Na2SO3可以降低植物色素、多元酚和銅製劑殘留的Cu2+等抑製PCR反應物質的榦擾作用.樣品浸提液經過離心處理,不僅可以有效濃縮靶細菌,提高檢測靈敏度,而且可以除去PCR反應抑製物質,大大降低瞭檢測的假陰性.
채용의거감길궤양병균독유단백기인적보수구단설계적특이성인물급기확증체계진행측시.4충침포액중,침포액B적침제효과최호,최가침포시간위10～15 min.침제액진행가열멸활여불가열멸활처리,PCR확증결과무명현차이.대우무증감길양품,침포액중가입종농도위0.3%적Na2SO3가이강저식물색소、다원분화동제제잔류적Cu2+등억제PCR반응물질적간우작용.양품침제액경과리심처리,불부가이유효농축파세균,제고검측령민도,이차가이제거PCR반응억제물질,대대강저료검측적가음성.
