临床皮肤科杂志
臨床皮膚科雜誌
림상피부과잡지
JOURNAL OF CLINICAL DERMATOLOGY
2008年
2期
69-71
,共3页
刘官智%伍津津%朱堂友%鲁元刚%杨桂红
劉官智%伍津津%硃堂友%魯元剛%楊桂紅
류관지%오진진%주당우%로원강%양계홍
毛乳头细胞%基因,hTERT%端粒酶%人端粒酶反转录酶
毛乳頭細胞%基因,hTERT%耑粒酶%人耑粒酶反轉錄酶
모유두세포%기인,hTERT%단립매%인단립매반전록매
目的:明确外源性人端粒酶反转录酶(hTERT)基因转染能否激活体外培养人毛乳头细胞(DPC)的端粒酶.方法:采用脂质体转染法,将空载体质粒pIRES2-EGFP和含有hTERT基因的质粒pIRES2-EGFP-hTERT分别导入体外培养的正常人DPC,经G418筛选得到阳性克隆,连续传代培养.应用反转录(RT)-PCR法检测hTERT mRNA的表达,端粒重复序列扩增(TRAP)-ELISA法检测细胞端粒酶活性.结果:未转染DPC和空载体转染细胞(DPC-EGFP)无hTERT mRNA表达,端粒酶活性为阴性;而外源性hTERT基因转染细胞(DPC-hTERT)稳定表达hTERT mRNA,同时端粒酶活性转为阳性.结论:外源性hTERT基因转染能够激活体外培养人DPC的端粒酶,为建立永生化细胞系奠定基础.
目的:明確外源性人耑粒酶反轉錄酶(hTERT)基因轉染能否激活體外培養人毛乳頭細胞(DPC)的耑粒酶.方法:採用脂質體轉染法,將空載體質粒pIRES2-EGFP和含有hTERT基因的質粒pIRES2-EGFP-hTERT分彆導入體外培養的正常人DPC,經G418篩選得到暘性剋隆,連續傳代培養.應用反轉錄(RT)-PCR法檢測hTERT mRNA的錶達,耑粒重複序列擴增(TRAP)-ELISA法檢測細胞耑粒酶活性.結果:未轉染DPC和空載體轉染細胞(DPC-EGFP)無hTERT mRNA錶達,耑粒酶活性為陰性;而外源性hTERT基因轉染細胞(DPC-hTERT)穩定錶達hTERT mRNA,同時耑粒酶活性轉為暘性.結論:外源性hTERT基因轉染能夠激活體外培養人DPC的耑粒酶,為建立永生化細胞繫奠定基礎.
목적:명학외원성인단립매반전록매(hTERT)기인전염능부격활체외배양인모유두세포(DPC)적단립매.방법:채용지질체전염법,장공재체질립pIRES2-EGFP화함유hTERT기인적질립pIRES2-EGFP-hTERT분별도입체외배양적정상인DPC,경G418사선득도양성극륭,련속전대배양.응용반전록(RT)-PCR법검측hTERT mRNA적표체,단립중복서렬확증(TRAP)-ELISA법검측세포단립매활성.결과:미전염DPC화공재체전염세포(DPC-EGFP)무hTERT mRNA표체,단립매활성위음성;이외원성hTERT기인전염세포(DPC-hTERT)은정표체hTERT mRNA,동시단립매활성전위양성.결론:외원성hTERT기인전염능구격활체외배양인DPC적단립매,위건립영생화세포계전정기출.
