南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2008年
12期
2150-2153
,共4页
李世林%王行环%王怀鹏%杨中华%高炜城%蒲小勇
李世林%王行環%王懷鵬%楊中華%高煒城%蒲小勇
리세림%왕행배%왕부붕%양중화%고위성%포소용
瞬时受体电位M型%瞬时受体电位V型%生精细胞
瞬時受體電位M型%瞬時受體電位V型%生精細胞
순시수체전위M형%순시수체전위V형%생정세포
目的 探讨瞬时受体电位M型(TRPM)及V型(TRPV)家族基因在大鼠牛精细胞中的表达.方法 采用机械法分离大鼠生精细胞,TRIzol法提取细胞总RNA,RT-PCR合成并扩增目的 基因,琼脂糖凝胶电泳检测目的 基因的存在,实时荧光定量RT-PCR技术检测目的 基因相对表达量.结果 在大鼠生精细胞中检测到TRPM3、TRPM4、TRPM7及TRPV5 mRNA的表达,未能检测到TRPM1、TRPM2、TRPM5、TRPM6、TRPM8、TRPV1、TRPV2、TRPV3、TRPV4及TRPV6 mRNA的表达.实时荧光定量RT-PCR技术检测显示TRPM家族在大鼠睾丸生精细胞中的表达以TRPM7表达量最高,相当于内参β-actin的(0.0430±0.0034)%,TRPM3和TRPM4表达相对较弱,分别相当于TRPM7 56%和63%.大鼠睾丸生精细胞中TRPV家族仅存在TRPV5的表达,其表达量相当于内参β-actin的(O.0157±0.0029)%.结论 大鼠生精细胞中存在多种TRPM及TRPV家族基因的表达,其中TRPM4及TRPM7 mRNA在大鼠生精细胞中呈相对较高表达.本研究结果 将为研究生精细胞中TRP通道的功能及TRP通道各亚型之间的相互关系提供参考依据.
目的 探討瞬時受體電位M型(TRPM)及V型(TRPV)傢族基因在大鼠牛精細胞中的錶達.方法 採用機械法分離大鼠生精細胞,TRIzol法提取細胞總RNA,RT-PCR閤成併擴增目的 基因,瓊脂糖凝膠電泳檢測目的 基因的存在,實時熒光定量RT-PCR技術檢測目的 基因相對錶達量.結果 在大鼠生精細胞中檢測到TRPM3、TRPM4、TRPM7及TRPV5 mRNA的錶達,未能檢測到TRPM1、TRPM2、TRPM5、TRPM6、TRPM8、TRPV1、TRPV2、TRPV3、TRPV4及TRPV6 mRNA的錶達.實時熒光定量RT-PCR技術檢測顯示TRPM傢族在大鼠睪汍生精細胞中的錶達以TRPM7錶達量最高,相噹于內參β-actin的(0.0430±0.0034)%,TRPM3和TRPM4錶達相對較弱,分彆相噹于TRPM7 56%和63%.大鼠睪汍生精細胞中TRPV傢族僅存在TRPV5的錶達,其錶達量相噹于內參β-actin的(O.0157±0.0029)%.結論 大鼠生精細胞中存在多種TRPM及TRPV傢族基因的錶達,其中TRPM4及TRPM7 mRNA在大鼠生精細胞中呈相對較高錶達.本研究結果 將為研究生精細胞中TRP通道的功能及TRP通道各亞型之間的相互關繫提供參攷依據.
목적 탐토순시수체전위M형(TRPM)급V형(TRPV)가족기인재대서우정세포중적표체.방법 채용궤계법분리대서생정세포,TRIzol법제취세포총RNA,RT-PCR합성병확증목적 기인,경지당응효전영검측목적 기인적존재,실시형광정량RT-PCR기술검측목적 기인상대표체량.결과 재대서생정세포중검측도TRPM3、TRPM4、TRPM7급TRPV5 mRNA적표체,미능검측도TRPM1、TRPM2、TRPM5、TRPM6、TRPM8、TRPV1、TRPV2、TRPV3、TRPV4급TRPV6 mRNA적표체.실시형광정량RT-PCR기술검측현시TRPM가족재대서고환생정세포중적표체이TRPM7표체량최고,상당우내삼β-actin적(0.0430±0.0034)%,TRPM3화TRPM4표체상대교약,분별상당우TRPM7 56%화63%.대서고환생정세포중TRPV가족부존재TRPV5적표체,기표체량상당우내삼β-actin적(O.0157±0.0029)%.결론 대서생정세포중존재다충TRPM급TRPV가족기인적표체,기중TRPM4급TRPM7 mRNA재대서생정세포중정상대교고표체.본연구결과 장위연구생정세포중TRP통도적공능급TRP통도각아형지간적상호관계제공삼고의거.