大连水产学院学报
大連水產學院學報
대련수산학원학보
JOURNAL OF DALIAN FISHERIES UNIVERSITY
2009年
1期
24-29
,共6页
李俊%马悦欣%冯兵%于杨
李俊%馬悅訢%馮兵%于楊
리준%마열흔%풍병%우양
卡拉胶酶产生菌%筛选%发酵条件%优化
卡拉膠酶產生菌%篩選%髮酵條件%優化
잡랍효매산생균%사선%발효조건%우화
对κ-卡拉胶酶产生菌进行富集培养,以κ-卡拉胶为唯一碳源的平板初筛,从多种海藻上分离纯化获得32株具有卡拉胶酶活性的菌株,经摇瓶复筛,从亮管藻上分离的HC4菌株酶活力最高,为50.75 U/mL.测定了HC4菌株的16S rRNA 基因序列1436 bp,在核苷酸序列数据库(NCBI)中进行同源性检索,发现它与Tamlana agarivorans的相似性为98%.通过单因子筛选和正交试验,确定该菌株产酶的最佳培养基组成为:碳源κ-卡拉胶5 g/L;氮源蛋白胨3 g/L和NaNO3 1 g/L;无机盐NaCl 20 g/L、K2HPO4·3H2O 1 g/L、MgSO4·7H2O 0.5 g/L和CaCl2 0.1 g/L.最佳培养条件为:摇床转速150 r/min,250 mL三角瓶中发酵培养基的装液量50 mL,接种量4%,发酵培养基起始pH 7.5,温度28 ℃,培养时间28 h.经培养基组成及培养条件优化后,HC4菌株的κ-卡拉胶酶酶活力提高到602.30 U/mL,是优化前的11.87倍.
對κ-卡拉膠酶產生菌進行富集培養,以κ-卡拉膠為唯一碳源的平闆初篩,從多種海藻上分離純化穫得32株具有卡拉膠酶活性的菌株,經搖瓶複篩,從亮管藻上分離的HC4菌株酶活力最高,為50.75 U/mL.測定瞭HC4菌株的16S rRNA 基因序列1436 bp,在覈苷痠序列數據庫(NCBI)中進行同源性檢索,髮現它與Tamlana agarivorans的相似性為98%.通過單因子篩選和正交試驗,確定該菌株產酶的最佳培養基組成為:碳源κ-卡拉膠5 g/L;氮源蛋白胨3 g/L和NaNO3 1 g/L;無機鹽NaCl 20 g/L、K2HPO4·3H2O 1 g/L、MgSO4·7H2O 0.5 g/L和CaCl2 0.1 g/L.最佳培養條件為:搖床轉速150 r/min,250 mL三角瓶中髮酵培養基的裝液量50 mL,接種量4%,髮酵培養基起始pH 7.5,溫度28 ℃,培養時間28 h.經培養基組成及培養條件優化後,HC4菌株的κ-卡拉膠酶酶活力提高到602.30 U/mL,是優化前的11.87倍.
대κ-잡랍효매산생균진행부집배양,이κ-잡랍효위유일탄원적평판초사,종다충해조상분리순화획득32주구유잡랍효매활성적균주,경요병복사,종량관조상분리적HC4균주매활력최고,위50.75 U/mL.측정료HC4균주적16S rRNA 기인서렬1436 bp,재핵감산서렬수거고(NCBI)중진행동원성검색,발현타여Tamlana agarivorans적상사성위98%.통과단인자사선화정교시험,학정해균주산매적최가배양기조성위:탄원κ-잡랍효5 g/L;담원단백동3 g/L화NaNO3 1 g/L;무궤염NaCl 20 g/L、K2HPO4·3H2O 1 g/L、MgSO4·7H2O 0.5 g/L화CaCl2 0.1 g/L.최가배양조건위:요상전속150 r/min,250 mL삼각병중발효배양기적장액량50 mL,접충량4%,발효배양기기시pH 7.5,온도28 ℃,배양시간28 h.경배양기조성급배양조건우화후,HC4균주적κ-잡랍효매매활력제고도602.30 U/mL,시우화전적11.87배.
