热带作物学报
熱帶作物學報
열대작물학보
CHINESE JOURNAL OF TROPICAL CROPS
2009年
1期
64-69
,共6页
庄振宏%李兰%孙宪连%张新艳%单超%汪世华%王宗华
莊振宏%李蘭%孫憲連%張新豔%單超%汪世華%王宗華
장진굉%리란%손헌련%장신염%단초%왕세화%왕종화
黄曲霉毒素B1%单链抗体%抗体库%抗黄曲霉毒素B1 scFv菌株
黃麯黴毒素B1%單鏈抗體%抗體庫%抗黃麯黴毒素B1 scFv菌株
황곡매독소B1%단련항체%항체고%항황곡매독소B1 scFv균주
从抗黄曲霉毒素B1单克隆抗体细胞系中扩增到重链可变区(VH)和轻链可变区(VL),经PCR将VH、Linker和VL连接成单链抗体(scFv),并克隆到载体pCANTAB-5E,经电转化大肠杆菌TG1,构建了库容量为1×108的单链抗体库.通过辅助噬菌体M13K07感染后,使单链抗体展示在噬菌体衣壳蛋白pⅢ的N端,得到客容量为1×108的噬菌体展示的抗体库.将抗体库用于"淘洗-富集-扩增"4轮以后,得到针对AFB1特异性的噬菌体抗体.进一步以噬菌体感染大肠杆菌HB2151,在细菌细胞周质中可溶性大量表达,最终经竞争EUSA分析表明获得了3株可以稳定分泌抗黄曲霉毒素B1 scFv菌株,分别命名为3C3、383和4A2.
從抗黃麯黴毒素B1單剋隆抗體細胞繫中擴增到重鏈可變區(VH)和輕鏈可變區(VL),經PCR將VH、Linker和VL連接成單鏈抗體(scFv),併剋隆到載體pCANTAB-5E,經電轉化大腸桿菌TG1,構建瞭庫容量為1×108的單鏈抗體庫.通過輔助噬菌體M13K07感染後,使單鏈抗體展示在噬菌體衣殼蛋白pⅢ的N耑,得到客容量為1×108的噬菌體展示的抗體庫.將抗體庫用于"淘洗-富集-擴增"4輪以後,得到針對AFB1特異性的噬菌體抗體.進一步以噬菌體感染大腸桿菌HB2151,在細菌細胞週質中可溶性大量錶達,最終經競爭EUSA分析錶明穫得瞭3株可以穩定分泌抗黃麯黴毒素B1 scFv菌株,分彆命名為3C3、383和4A2.
종항황곡매독소B1단극륭항체세포계중확증도중련가변구(VH)화경련가변구(VL),경PCR장VH、Linker화VL련접성단련항체(scFv),병극륭도재체pCANTAB-5E,경전전화대장간균TG1,구건료고용량위1×108적단련항체고.통과보조서균체M13K07감염후,사단련항체전시재서균체의각단백pⅢ적N단,득도객용량위1×108적서균체전시적항체고.장항체고용우"도세-부집-확증"4륜이후,득도침대AFB1특이성적서균체항체.진일보이서균체감염대장간균HB2151,재세균세포주질중가용성대량표체,최종경경쟁EUSA분석표명획득료3주가이은정분비항황곡매독소B1 scFv균주,분별명명위3C3、383화4A2.
