安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2009年
16期
7387-7388,7395
,共3页
郝变青%马利平%乔雄梧%张丽珍
郝變青%馬利平%喬雄梧%張麗珍
학변청%마리평%교웅오%장려진
拮抗菌%绿色荧光蛋白%启动子%克隆
拮抗菌%綠色熒光蛋白%啟動子%剋隆
길항균%록색형광단백%계동자%극륭
[目的]构建拮抗菌B96-II的启动子文库,为B96-II的绿色荧光蛋白标记提供试验基础.[方法] 提取拮抗菌B96-II的基因组DNA,以绿色荧光蛋白基因(gfp)为报告基因,以启动子探针pNW33N-gfp为载体,通过鸟枪法在E. coli DH5α中构建B96-II的启动子文库.[结果] 通过筛选获得了21个阳性克隆,编号为P1～P21,这些阳性克隆在荧光显微镜下发出明亮的绿色荧光.研究表明,在热激时间为90 s、用4 μl 酶连产物原液进行转化时,所得转化子数量最多,平均每平皿可得到167个转化子.[结论] 表达绿色荧光蛋白的B96-II启动子文库的成功构建为拮抗菌B96-II的绿色荧光蛋白标记和环境行为研究奠定了良好的基础.
[目的]構建拮抗菌B96-II的啟動子文庫,為B96-II的綠色熒光蛋白標記提供試驗基礎.[方法] 提取拮抗菌B96-II的基因組DNA,以綠色熒光蛋白基因(gfp)為報告基因,以啟動子探針pNW33N-gfp為載體,通過鳥鎗法在E. coli DH5α中構建B96-II的啟動子文庫.[結果] 通過篩選穫得瞭21箇暘性剋隆,編號為P1～P21,這些暘性剋隆在熒光顯微鏡下髮齣明亮的綠色熒光.研究錶明,在熱激時間為90 s、用4 μl 酶連產物原液進行轉化時,所得轉化子數量最多,平均每平皿可得到167箇轉化子.[結論] 錶達綠色熒光蛋白的B96-II啟動子文庫的成功構建為拮抗菌B96-II的綠色熒光蛋白標記和環境行為研究奠定瞭良好的基礎.
[목적]구건길항균B96-II적계동자문고,위B96-II적록색형광단백표기제공시험기출.[방법] 제취길항균B96-II적기인조DNA,이록색형광단백기인(gfp)위보고기인,이계동자탐침pNW33N-gfp위재체,통과조창법재E. coli DH5α중구건B96-II적계동자문고.[결과] 통과사선획득료21개양성극륭,편호위P1～P21,저사양성극륭재형광현미경하발출명량적록색형광.연구표명,재열격시간위90 s、용4 μl 매련산물원액진행전화시,소득전화자수량최다,평균매평명가득도167개전화자.[결론] 표체록색형광단백적B96-II계동자문고적성공구건위길항균B96-II적록색형광단백표기화배경행위연구전정료량호적기출.
