畜牧与兽医
畜牧與獸醫
축목여수의
ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2009年
10期
51-54
,共4页
刘志宗%葛亚明%宁红梅%张映%聂向庭
劉誌宗%葛亞明%寧紅梅%張映%聶嚮庭
류지종%갈아명%저홍매%장영%섭향정
猪肺炎支原体%P46%基因特异性随机肽库
豬肺炎支原體%P46%基因特異性隨機肽庫
저폐염지원체%P46%기인특이성수궤태고
通过构建猪肺炎支原体膜蛋白P46的噬菌体展示肽库.以筛选其特异性抗原表位.用DNase Ⅰ随机消化法获取P46基因主要抗原序列(不舍信号肽的编码序列)的随机片段.片段经与pBamH Ⅰ Linker连接和BamH Ⅰ酶切后,克隆到pC89 pⅧ型噬菌粒载体,重组噬菌粒转化感受态细胞XL1-Blue,辅助噬菌体VCSM13超感染,从而构建了P46基因特异性噬菌体随机肽库.结果,所建肽库含有约2.3×104个不同克隆,滴度约为1.3×1014PFU/mL.说明所建肽库具有较大库容和较好的多样性,可满足P46蛋白抗原表位的筛选.
通過構建豬肺炎支原體膜蛋白P46的噬菌體展示肽庫.以篩選其特異性抗原錶位.用DNase Ⅰ隨機消化法穫取P46基因主要抗原序列(不捨信號肽的編碼序列)的隨機片段.片段經與pBamH Ⅰ Linker連接和BamH Ⅰ酶切後,剋隆到pC89 pⅧ型噬菌粒載體,重組噬菌粒轉化感受態細胞XL1-Blue,輔助噬菌體VCSM13超感染,從而構建瞭P46基因特異性噬菌體隨機肽庫.結果,所建肽庫含有約2.3×104箇不同剋隆,滴度約為1.3×1014PFU/mL.說明所建肽庫具有較大庫容和較好的多樣性,可滿足P46蛋白抗原錶位的篩選.
통과구건저폐염지원체막단백P46적서균체전시태고.이사선기특이성항원표위.용DNase Ⅰ수궤소화법획취P46기인주요항원서렬(불사신호태적편마서렬)적수궤편단.편단경여pBamH Ⅰ Linker련접화BamH Ⅰ매절후,극륭도pC89 pⅧ형서균립재체,중조서균립전화감수태세포XL1-Blue,보조서균체VCSM13초감염,종이구건료P46기인특이성서균체수궤태고.결과,소건태고함유약2.3×104개불동극륭,적도약위1.3×1014PFU/mL.설명소건태고구유교대고용화교호적다양성,가만족P46단백항원표위적사선.
