物理化学学报
物理化學學報
물이화학학보
ACTA PHYSICO-CHIMICA SINICA
2011年
11期
2697-2704
,共8页
辣根过氧化酶%固定化酶%甲基丙烯酸缩水甘油酯%复合载体%静电相互作用%疏水相互作用
辣根過氧化酶%固定化酶%甲基丙烯痠縮水甘油酯%複閤載體%靜電相互作用%疏水相互作用
랄근과양화매%고정화매%갑기병희산축수감유지%복합재체%정전상호작용%소수상호작용
将甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)接枝聚合在微米级硅胶微粒表面,又通过环氧基团的开环反应将乙二胺(EDA)键合在接枝微粒表面,制备了双功能复合载体EDA-PGMA/SiO2,通过共价偶联法实施了辣根过氧化酶(HRP)的固定化.本文重点考察静电相互作用与疏水相互作用两种次价键力在共价键合法固定HRP过程中的作用,探讨作用机理.结果表明,在水介质中,复合载体EDA-PGMA/SiO2表面胺基的质子化作用,使载体微粒的ζ电位在较大的pH范围内保持正值;当介质的pH=8.5,大于HRP的等电点时,酶蛋白与载体之间所产生的强静电相互作用会显著促进HRP的固定化;EDA的键合率在30％附近的载体,静电相互作用对固酶的促进作用最强,固定化酶的偶联率与比活力具有最高值.疏水相互作用对化学法固定辣根过氧化酶也会产生明显的作用,当以接枝微粒PGMA/SiO2为载体时,增大NaCl浓度,可有效促进酶蛋白与载体之间的疏水相互作用,提高固定化酶的偶联率与比活力.
將甲基丙烯痠縮水甘油酯(GMA)接枝聚閤在微米級硅膠微粒錶麵,又通過環氧基糰的開環反應將乙二胺(EDA)鍵閤在接枝微粒錶麵,製備瞭雙功能複閤載體EDA-PGMA/SiO2,通過共價偶聯法實施瞭辣根過氧化酶(HRP)的固定化.本文重點攷察靜電相互作用與疏水相互作用兩種次價鍵力在共價鍵閤法固定HRP過程中的作用,探討作用機理.結果錶明,在水介質中,複閤載體EDA-PGMA/SiO2錶麵胺基的質子化作用,使載體微粒的ζ電位在較大的pH範圍內保持正值;噹介質的pH=8.5,大于HRP的等電點時,酶蛋白與載體之間所產生的彊靜電相互作用會顯著促進HRP的固定化;EDA的鍵閤率在30％附近的載體,靜電相互作用對固酶的促進作用最彊,固定化酶的偶聯率與比活力具有最高值.疏水相互作用對化學法固定辣根過氧化酶也會產生明顯的作用,噹以接枝微粒PGMA/SiO2為載體時,增大NaCl濃度,可有效促進酶蛋白與載體之間的疏水相互作用,提高固定化酶的偶聯率與比活力.
장갑기병희산축수감유지(GMA)접지취합재미미급규효미립표면,우통과배양기단적개배반응장을이알(EDA)건합재접지미립표면,제비료쌍공능복합재체EDA-PGMA/SiO2,통과공개우련법실시료랄근과양화매(HRP)적고정화.본문중점고찰정전상호작용여소수상호작용량충차개건력재공개건합법고정HRP과정중적작용,탐토작용궤리.결과표명,재수개질중,복합재체EDA-PGMA/SiO2표면알기적질자화작용,사재체미립적ζ전위재교대적pH범위내보지정치;당개질적pH=8.5,대우HRP적등전점시,매단백여재체지간소산생적강정전상호작용회현저촉진HRP적고정화;EDA적건합솔재30％부근적재체,정전상호작용대고매적촉진작용최강,고정화매적우련솔여비활력구유최고치.소수상호작용대화학법고정랄근과양화매야회산생명현적작용,당이접지미립PGMA/SiO2위재체시,증대NaCl농도,가유효촉진매단백여재체지간적소수상호작용,제고고정화매적우련솔여비활력.
