重庆医科大学学报
重慶醫科大學學報
중경의과대학학보
UNIVERSITATIS SCIENTIAE MEDICINAE CHONGQING
2012年
5期
445-448
,共4页
人α1微球蛋白质%表达%纯化%活性鉴定
人α1微毬蛋白質%錶達%純化%活性鑒定
인α1미구단백질%표체%순화%활성감정
目的:构建人α1微球蛋白质(α1 -microglobulin,α1M)基因的原核表达质粒,在大肠杆菌中表达α1M蛋白质,纯化并初步鉴定其生物学活性.方法:PCR扩增α1M基因序列,然后转化人大肠杆菌B834中进行表达,利用镍离子亲和层析、离子交换层析及分子筛纯化,ABTS法鉴定其生物学活性.结果:正确构建了α1M的表达质粒,α1M在大肠杆菌B834中为可溶性上清表达,纯化获得了纯度高达95％的α1M蛋白质,分子筛结果显示其在溶液中呈现单体和二聚体2种聚集状态.ABTS法结果显示了重组获得的α1M具有抗氧化活性.结论:α1M能在大肠杆菌B834菌中大量上清表达,且易于纯化,初步鉴定具有抗氧化活性,为下一步进行α1M蛋白质的晶体结构解析和相关功能研究奠定了基础.
目的:構建人α1微毬蛋白質(α1 -microglobulin,α1M)基因的原覈錶達質粒,在大腸桿菌中錶達α1M蛋白質,純化併初步鑒定其生物學活性.方法:PCR擴增α1M基因序列,然後轉化人大腸桿菌B834中進行錶達,利用鎳離子親和層析、離子交換層析及分子篩純化,ABTS法鑒定其生物學活性.結果:正確構建瞭α1M的錶達質粒,α1M在大腸桿菌B834中為可溶性上清錶達,純化穫得瞭純度高達95％的α1M蛋白質,分子篩結果顯示其在溶液中呈現單體和二聚體2種聚集狀態.ABTS法結果顯示瞭重組穫得的α1M具有抗氧化活性.結論:α1M能在大腸桿菌B834菌中大量上清錶達,且易于純化,初步鑒定具有抗氧化活性,為下一步進行α1M蛋白質的晶體結構解析和相關功能研究奠定瞭基礎.
목적:구건인α1미구단백질(α1 -microglobulin,α1M)기인적원핵표체질립,재대장간균중표체α1M단백질,순화병초보감정기생물학활성.방법:PCR확증α1M기인서렬,연후전화인대장간균B834중진행표체,이용얼리자친화층석、리자교환층석급분자사순화,ABTS법감정기생물학활성.결과:정학구건료α1M적표체질립,α1M재대장간균B834중위가용성상청표체,순화획득료순도고체95％적α1M단백질,분자사결과현시기재용액중정현단체화이취체2충취집상태.ABTS법결과현시료중조획득적α1M구유항양화활성.결론:α1M능재대장간균B834균중대량상청표체,차역우순화,초보감정구유항양화활성,위하일보진행α1M단백질적정체결구해석화상관공능연구전정료기출.
