口腔生物医学
口腔生物醫學
구강생물의학
ORAL BIOMEDICINE
2012年
3期
117-119,123
,共4页
杨聪翀%朱丽芳%宁天云%宋晓陵%张玮%刘来奎
楊聰翀%硃麗芳%寧天雲%宋曉陵%張瑋%劉來奎
양총충%주려방%저천운%송효릉%장위%류래규
口腔黏膜鳞癌%膜型基质金属蛋白酶-1%miRNA干扰%基因
口腔黏膜鱗癌%膜型基質金屬蛋白酶-1%miRNA榦擾%基因
구강점막린암%막형기질금속단백매-1%miRNA간우%기인
目的:构建膜型基质金属蛋白酶-1(membrane-type matrix metalloproteinase-1,MT1-MMP)基因miRNA干扰载体,检测其对靶基因的沉默效率.方法:设计4种MT1-MMP基因特异性miRNA寡聚单链DNA,利用载体构建试剂盒构建MT1-MMP基因特异性干扰质粒,挑选阳性克隆,测序无误后扩增,表明载体构建成功.抽提干扰质粒,用脂质体2000转染HEK293细胞,通过实时荧光定量PCR法检测干扰载体对靶基因的干扰效果.结果:本实验成功构建了MT1-MMP miRNA干扰载体,筛选出最有效的干扰载体X173-4,并检测出其对靶基因的沉默效率可达到75%.结论:本实验结果为进一步研究MT1-MMP在口腔癌侵袭转移机制中的作用提供实验基础.
目的:構建膜型基質金屬蛋白酶-1(membrane-type matrix metalloproteinase-1,MT1-MMP)基因miRNA榦擾載體,檢測其對靶基因的沉默效率.方法:設計4種MT1-MMP基因特異性miRNA寡聚單鏈DNA,利用載體構建試劑盒構建MT1-MMP基因特異性榦擾質粒,挑選暘性剋隆,測序無誤後擴增,錶明載體構建成功.抽提榦擾質粒,用脂質體2000轉染HEK293細胞,通過實時熒光定量PCR法檢測榦擾載體對靶基因的榦擾效果.結果:本實驗成功構建瞭MT1-MMP miRNA榦擾載體,篩選齣最有效的榦擾載體X173-4,併檢測齣其對靶基因的沉默效率可達到75%.結論:本實驗結果為進一步研究MT1-MMP在口腔癌侵襲轉移機製中的作用提供實驗基礎.
목적:구건막형기질금속단백매-1(membrane-type matrix metalloproteinase-1,MT1-MMP)기인miRNA간우재체,검측기대파기인적침묵효솔.방법:설계4충MT1-MMP기인특이성miRNA과취단련DNA,이용재체구건시제합구건MT1-MMP기인특이성간우질립,도선양성극륭,측서무오후확증,표명재체구건성공.추제간우질립,용지질체2000전염HEK293세포,통과실시형광정량PCR법검측간우재체대파기인적간우효과.결과:본실험성공구건료MT1-MMP miRNA간우재체,사선출최유효적간우재체X173-4,병검측출기대파기인적침묵효솔가체도75%.결론:본실험결과위진일보연구MT1-MMP재구강암침습전이궤제중적작용제공실험기출.
