畜牧与兽医
畜牧與獸醫
축목여수의
ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2012年
10期
54-58
,共5页
FAT1基因%密码子优化%真核表达
FAT1基因%密碼子優化%真覈錶達
FAT1기인%밀마자우화%진핵표체
ω-3长链多不饱和脂肪酸对人体的营养和健康具有重要意义,一旦缺乏将会引起人类各种疾病.去饱和酶FAT1基因是在线虫中合成ω-3长链多不饱和脂肪酸最关键的基因.为了对FAT1基因的密码子进行优化,并构建一个真核表达载体,利用JCat软件对FAT1基因进行了密码子优化,得到一个优化后的基因FAT1m.设计突变引物,利用重叠PCR法拼接全长FAT1m基因,并连接到pBudCE载体中.结果表明:FAT1m基因的16个密码子被改造,包括Val2个,Ser2个,Gln8个,Leu4个,但是并没有改变氨基酸序列.并且把FAT1m基因连接到pBudCE载体,成功构建了真核表达载体pBud-FAT1m.
ω-3長鏈多不飽和脂肪痠對人體的營養和健康具有重要意義,一旦缺乏將會引起人類各種疾病.去飽和酶FAT1基因是在線蟲中閤成ω-3長鏈多不飽和脂肪痠最關鍵的基因.為瞭對FAT1基因的密碼子進行優化,併構建一箇真覈錶達載體,利用JCat軟件對FAT1基因進行瞭密碼子優化,得到一箇優化後的基因FAT1m.設計突變引物,利用重疊PCR法拼接全長FAT1m基因,併連接到pBudCE載體中.結果錶明:FAT1m基因的16箇密碼子被改造,包括Val2箇,Ser2箇,Gln8箇,Leu4箇,但是併沒有改變氨基痠序列.併且把FAT1m基因連接到pBudCE載體,成功構建瞭真覈錶達載體pBud-FAT1m.
ω-3장련다불포화지방산대인체적영양화건강구유중요의의,일단결핍장회인기인류각충질병.거포화매FAT1기인시재선충중합성ω-3장련다불포화지방산최관건적기인.위료대FAT1기인적밀마자진행우화,병구건일개진핵표체재체,이용JCat연건대FAT1기인진행료밀마자우화,득도일개우화후적기인FAT1m.설계돌변인물,이용중첩PCR법병접전장FAT1m기인,병련접도pBudCE재체중.결과표명:FAT1m기인적16개밀마자피개조,포괄Val2개,Ser2개,Gln8개,Leu4개,단시병몰유개변안기산서렬.병차파FAT1m기인련접도pBudCE재체,성공구건료진핵표체재체pBud-FAT1m.