中华传染病杂志
中華傳染病雜誌
중화전염병잡지
CHINESE JOURNAL OF INFECTIOUS DISEASES
2005年
3期
170-173
,共4页
蒋卫民%卢洪洲%潘孝彰%康来仪%尹春煜%胡越凯%翁心华
蔣衛民%盧洪洲%潘孝彰%康來儀%尹春煜%鬍越凱%翁心華
장위민%로홍주%반효창%강래의%윤춘욱%호월개%옹심화
HIV核心蛋白质p24%HIV包膜蛋白质gp41%基因表达%重组融合蛋白质类
HIV覈心蛋白質p24%HIV包膜蛋白質gp41%基因錶達%重組融閤蛋白質類
HIV핵심단백질p24%HIV포막단백질gp41%기인표체%중조융합단백질류
目的用基因重组技术将HIV-1 p24基因以及gp41基因具有抗原线性中和表位的部分重组连接,构建重组质粒,并在大肠埃希菌中高效表达融合蛋白.方法设计带有酶切位点的引物,分别PCR扩增p24和gp41两个基因,将它们分别连接到pMD18-T载体中,测序验证后,挑选出含有目的基因的正确克隆.将p24片段酶切后连接到gp41基因所在的pMD18-T载体中,再将连接后的两个基因酶切,重新连接到pET21a表达载体中.将表达载体转染大肠埃希菌诱导表达,经Western-blot验证表达正确.结果融合蛋白p24-gp41在大肠埃希菌中高效表达.结论融合蛋白p24-gp41可以在pET21a表达载体中高效表达.
目的用基因重組技術將HIV-1 p24基因以及gp41基因具有抗原線性中和錶位的部分重組連接,構建重組質粒,併在大腸埃希菌中高效錶達融閤蛋白.方法設計帶有酶切位點的引物,分彆PCR擴增p24和gp41兩箇基因,將它們分彆連接到pMD18-T載體中,測序驗證後,挑選齣含有目的基因的正確剋隆.將p24片段酶切後連接到gp41基因所在的pMD18-T載體中,再將連接後的兩箇基因酶切,重新連接到pET21a錶達載體中.將錶達載體轉染大腸埃希菌誘導錶達,經Western-blot驗證錶達正確.結果融閤蛋白p24-gp41在大腸埃希菌中高效錶達.結論融閤蛋白p24-gp41可以在pET21a錶達載體中高效錶達.
목적용기인중조기술장HIV-1 p24기인이급gp41기인구유항원선성중화표위적부분중조련접,구건중조질립,병재대장애희균중고효표체융합단백.방법설계대유매절위점적인물,분별PCR확증p24화gp41량개기인,장타문분별련접도pMD18-T재체중,측서험증후,도선출함유목적기인적정학극륭.장p24편단매절후련접도gp41기인소재적pMD18-T재체중,재장련접후적량개기인매절,중신련접도pET21a표체재체중.장표체재체전염대장애희균유도표체,경Western-blot험증표체정학.결과융합단백p24-gp41재대장애희균중고효표체.결론융합단백p24-gp41가이재pET21a표체재체중고효표체.
