癌症
癌癥
암증
CHINESE JOURNAL OF CANCER
2004年
1期
8-14
,共7页
孙继丽%贺修胜%余艳辉%陈主初
孫繼麗%賀脩勝%餘豔輝%陳主初
손계려%하수성%여염휘%진주초
肺癌%BNIP3L基因%表达下调%结构异常
肺癌%BNIP3L基因%錶達下調%結構異常
폐암%BNIP3L기인%표체하조%결구이상
背景与目的:BNIP3L(Bcl-2/E1B 19 kDa-interacting protein 3-like)基因是从人胎肝cDNA文库中克隆得到的具有抑瘤活性的基因,定位于8p21肺癌高频杂合性丢失(loss of heterozygosity,LOH)区;BNIP3L蛋白能与Bcl-2、Bcl-xL、E1B19K等抗凋亡蛋白相互作用,促进细胞凋亡.本研究旨在探讨BNIP3L基因表达、结构异常与肺癌发生、发展的关系.方法:采用免疫组化和免疫印迹技术、半定量逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-PCR,RT-PCR)、PCR-单链构象多态性(PCR-single strain conformation polymorphism,PCR-SSCP)分析等方法检测4种肺癌细胞株NCI-H520、A549、NCI-H460、NCI-H446和30例肺癌组织中BNIP3L基因的表达及结构异常.结果:(1)除NCI-H520细胞外,A549、NCI-H460和NCI-H446细胞中均无BNIP3L蛋白表达,NCI-H520细胞中BNIP3L蛋白表达水平也略低于永生化支气管上皮细胞HBE4-E6/E7.30例肺癌组织中BNIP3L蛋白阳性率为46.7%(14/30),12例正常肺组织中阳性率为100%(12/12),二者差异有统计学意义(P＜0.05).(2)4种肺癌细胞株中均存在BNIP3L mRNA表达,其表达水平与HBE4-E6/E7细胞相比无明显差异.30例肺癌组织中8例(26.7%)存在BNIP3L mRNA表达缺失或明显减弱,肺癌组织中BNIP3L mRNA平均表达量为0.404±0.070,配对正常肺组织为0.575±0.065,二者差异有显著性(P＜0.05).所有表达BNIP3L mRNA的肺癌细胞和组织,其RT-PCR产物(包括编码区全长)大小与对照样本一致,未检测到缺失、重排、剪切异常等BNIP3L基因结构改变.(3)4种肺癌细胞和30例肺癌组织中BNIP3L基因6个外显子均未检测到点突变.结论:BNIP3L蛋白在肺癌中存在表达下调,可能参与肺癌的发生、发展;BNIP3L蛋白在肺癌中表达下调部分是由转录下调造成的;基因结构异常可能不是BNIP3L在肺癌中失活的机制.
揹景與目的:BNIP3L(Bcl-2/E1B 19 kDa-interacting protein 3-like)基因是從人胎肝cDNA文庫中剋隆得到的具有抑瘤活性的基因,定位于8p21肺癌高頻雜閤性丟失(loss of heterozygosity,LOH)區;BNIP3L蛋白能與Bcl-2、Bcl-xL、E1B19K等抗凋亡蛋白相互作用,促進細胞凋亡.本研究旨在探討BNIP3L基因錶達、結構異常與肺癌髮生、髮展的關繫.方法:採用免疫組化和免疫印跡技術、半定量逆轉錄聚閤酶鏈反應(reverse transcription-PCR,RT-PCR)、PCR-單鏈構象多態性(PCR-single strain conformation polymorphism,PCR-SSCP)分析等方法檢測4種肺癌細胞株NCI-H520、A549、NCI-H460、NCI-H446和30例肺癌組織中BNIP3L基因的錶達及結構異常.結果:(1)除NCI-H520細胞外,A549、NCI-H460和NCI-H446細胞中均無BNIP3L蛋白錶達,NCI-H520細胞中BNIP3L蛋白錶達水平也略低于永生化支氣管上皮細胞HBE4-E6/E7.30例肺癌組織中BNIP3L蛋白暘性率為46.7%(14/30),12例正常肺組織中暘性率為100%(12/12),二者差異有統計學意義(P＜0.05).(2)4種肺癌細胞株中均存在BNIP3L mRNA錶達,其錶達水平與HBE4-E6/E7細胞相比無明顯差異.30例肺癌組織中8例(26.7%)存在BNIP3L mRNA錶達缺失或明顯減弱,肺癌組織中BNIP3L mRNA平均錶達量為0.404±0.070,配對正常肺組織為0.575±0.065,二者差異有顯著性(P＜0.05).所有錶達BNIP3L mRNA的肺癌細胞和組織,其RT-PCR產物(包括編碼區全長)大小與對照樣本一緻,未檢測到缺失、重排、剪切異常等BNIP3L基因結構改變.(3)4種肺癌細胞和30例肺癌組織中BNIP3L基因6箇外顯子均未檢測到點突變.結論:BNIP3L蛋白在肺癌中存在錶達下調,可能參與肺癌的髮生、髮展;BNIP3L蛋白在肺癌中錶達下調部分是由轉錄下調造成的;基因結構異常可能不是BNIP3L在肺癌中失活的機製.
배경여목적:BNIP3L(Bcl-2/E1B 19 kDa-interacting protein 3-like)기인시종인태간cDNA문고중극륭득도적구유억류활성적기인,정위우8p21폐암고빈잡합성주실(loss of heterozygosity,LOH)구;BNIP3L단백능여Bcl-2、Bcl-xL、E1B19K등항조망단백상호작용,촉진세포조망.본연구지재탐토BNIP3L기인표체、결구이상여폐암발생、발전적관계.방법:채용면역조화화면역인적기술、반정량역전록취합매련반응(reverse transcription-PCR,RT-PCR)、PCR-단련구상다태성(PCR-single strain conformation polymorphism,PCR-SSCP)분석등방법검측4충폐암세포주NCI-H520、A549、NCI-H460、NCI-H446화30례폐암조직중BNIP3L기인적표체급결구이상.결과:(1)제NCI-H520세포외,A549、NCI-H460화NCI-H446세포중균무BNIP3L단백표체,NCI-H520세포중BNIP3L단백표체수평야략저우영생화지기관상피세포HBE4-E6/E7.30례폐암조직중BNIP3L단백양성솔위46.7%(14/30),12례정상폐조직중양성솔위100%(12/12),이자차이유통계학의의(P＜0.05).(2)4충폐암세포주중균존재BNIP3L mRNA표체,기표체수평여HBE4-E6/E7세포상비무명현차이.30례폐암조직중8례(26.7%)존재BNIP3L mRNA표체결실혹명현감약,폐암조직중BNIP3L mRNA평균표체량위0.404±0.070,배대정상폐조직위0.575±0.065,이자차이유현저성(P＜0.05).소유표체BNIP3L mRNA적폐암세포화조직,기RT-PCR산물(포괄편마구전장)대소여대조양본일치,미검측도결실、중배、전절이상등BNIP3L기인결구개변.(3)4충폐암세포화30례폐암조직중BNIP3L기인6개외현자균미검측도점돌변.결론:BNIP3L단백재폐암중존재표체하조,가능삼여폐암적발생、발전;BNIP3L단백재폐암중표체하조부분시유전록하조조성적;기인결구이상가능불시BNIP3L재폐암중실활적궤제.
