CAJ | 학술논문

为了从分子水平了解中国流行性乙型脑炎(乙脑)病毒与国外分离株的差异,对1949年以来在中国乙脑主要流行地区分离的19株乙脑病毒的PrM-C区及E蛋白基因区的核苷酸序列进行了对比研究,以期了解不同时间不同地区在中国流行的乙脑病毒的分子差异.结果显示:病毒生物学初步鉴定显示,病毒感染BHK细胞后56h所有细胞均发生病变,约50%以上细胞脱落(CPE( ));3日龄乳鼠接种病毒72h之内死亡;所有病毒均与乙脑病毒(A2株)抗血清发生阳性反应,但反应强度不同,提示所有病毒均为乙脑病毒.病毒PrM-C(456～695)区核苷酸序列与各个国家及地区、各个基因型以及各个年代的73株乙脑病毒相应序列,用Woan-Ru Chen建立的方法进行基因分型分析,结果显示,所有19株中国分离的病毒均属于基因型Ⅲ型,与国外相关文献所报道的乙型脑炎病毒中国分离株的基因型相符.以乙型脑炎病毒疫苗株P3株为标准,对各病毒E蛋白500个氨基酸序列进行分析.各毒株核苷酸差异在0和4.2%之间,氨基酸差异在0和4.0%之间.所有核苷酸差异均为碱基的替换,无论核苷酸或氨基酸均无插入或丢失.大多数核苷酸变异在氨基酸编码的第三位,属于沉默突变,不引起氨基酸变化.18株病毒E蛋白活性结构域与疫苗株P3株相比共有247个氨基酸的差异,平均每株病毒有12.35个氨基酸的差异,有11株病毒(SA14、TLA、CZX、CBH、G35、GSS、LYZ、SH-3、YLG、YN、ZMT)在该区的差异数低于这个平均值.而在超过这一平均数的7个病毒株(A2、HA-3、47、CH-13、CTS、LFM、ZSZ)中,LFM、ZSZ、47与疫苗株相比较分别有16～20个氨基酸的差异,相对其它17株病毒而言,差异较为明显.以上线索提示,现有的乙型脑炎灭活疫苗在理论上可以覆盖包括现存病毒在内的毒株.
위료종분자수평료해중국류행성을형뇌염(을뇌)병독여국외분리주적차이,대1949년이래재중국을뇌주요류행지구분리적19주을뇌병독적PrM-C구급E단백기인구적핵감산서렬진행료대비연구,이기료해불동시간불동지구재중국류행적을뇌병독적분자차이.결과현시:병독생물학초보감정현시,병독감염BHK세포후56h소유세포균발생병변,약50%이상세포탈락(CPE( ));3일령유서접충병독72h지내사망;소유병독균여을뇌병독(A2주)항혈청발생양성반응,단반응강도불동,제시소유병독균위을뇌병독.병독PrM-C(456～695)구핵감산서렬여각개국가급지구、각개기인형이급각개년대적73주을뇌병독상응서렬,용Woan-Ru Chen건립적방법진행기인분형분석,결과현시,소유19주중국분리적병독균속우기인형Ⅲ형,여국외상관문헌소보도적을형뇌염병독중국분리주적기인형상부.이을형뇌염병독역묘주P3주위표준,대각병독E단백500개안기산서렬진행분석.각독주핵감산차이재0화4.2%지간,안기산차이재0화4.0%지간.소유핵감산차이균위감기적체환,무론핵감산혹안기산균무삽입혹주실.대다수핵감산변이재안기산편마적제삼위,속우침묵돌변,불인기안기산변화.18주병독E단백활성결구역여역묘주P3주상비공유247개안기산적차이,평균매주병독유12.35개안기산적차이,유11주병독(SA14、TLA、CZX、CBH、G35、GSS、LYZ、SH-3、YLG、YN、ZMT)재해구적차이수저우저개평균치.이재초과저일평균수적7개병독주(A2、HA-3、47、CH-13、CTS、LFM、ZSZ)중,LFM、ZSZ、47여역묘주상비교분별유16～20개안기산적차이,상대기타17주병독이언,차이교위명현.이상선색제시,현유적을형뇌염멸활역묘재이론상가이복개포괄현존병독재내적독주.