寄生虫病与感染性疾病
寄生蟲病與感染性疾病
기생충병여감염성질병
PARASITOSES AND INFECTIOUS DISECSES
2005年
2期
49-53
,共5页
王秀珍%曹昌志%肖永富%钟波%刘国栋%邱东川%黎世涛
王秀珍%曹昌誌%肖永富%鐘波%劉國棟%邱東川%黎世濤
왕수진%조창지%초영부%종파%류국동%구동천%려세도
血吸虫%抗原%免疫酶技术%标准化
血吸蟲%抗原%免疫酶技術%標準化
혈흡충%항원%면역매기술%표준화
目的研制标准化的血吸虫循环抗原(SCAg)酶免疫法检测试剂,建立规模化生产能力.方法通过体外培养及分子筛液相色谱获取虫源性及虫卵源性SCAg,用免疫增强剂和淋巴结内免疫法制备高效、特异抗SCAg的捕捉抗体,应用半抗原抗体桥放大技术制备高灵敏度SCAg识别探针,通过抗氧化剂及螯合剂比较研究制备稳定的底物系统,按医学决定水平确定免疫学质量控制标准及参考,优选原材料质量,规范生产工艺,研究制定反应体系的标准化,建立SCAg快速研发的技术平台.结果 TCA提取的SCAg测出最低含量为1 ng/ml(10-9g),对实验高感染(1 000±10条尾蚴)家兔混合血清检测的终点滴度可达1∶ 1 280以上,有效诊断率为96.29%,研制的SCAg试剂的批内变异4.69%7.66%,批间变异4.12%7.19%,一年内同批试剂分次对定值血清测定OD值变化小于10%,显示一年内为有效期.通过SCAg技术平台,进一步研究开发了囊尾蚴CAg、弓形体CAg的检测方法,初步实验观察对囊尾蚴囊液及感染弓形体5 d的小鼠腹水抗原检测滴度分别达到1∶ 640及1∶ 1 280. 结论 SCAg标准化平台技术可大量地、快速地提供标准化的血吸虫病诊断试剂,对其他寄生虫CAg检测显示有较好的应用前景.
目的研製標準化的血吸蟲循環抗原(SCAg)酶免疫法檢測試劑,建立規模化生產能力.方法通過體外培養及分子篩液相色譜穫取蟲源性及蟲卵源性SCAg,用免疫增彊劑和淋巴結內免疫法製備高效、特異抗SCAg的捕捉抗體,應用半抗原抗體橋放大技術製備高靈敏度SCAg識彆探針,通過抗氧化劑及螯閤劑比較研究製備穩定的底物繫統,按醫學決定水平確定免疫學質量控製標準及參攷,優選原材料質量,規範生產工藝,研究製定反應體繫的標準化,建立SCAg快速研髮的技術平檯.結果 TCA提取的SCAg測齣最低含量為1 ng/ml(10-9g),對實驗高感染(1 000±10條尾蚴)傢兔混閤血清檢測的終點滴度可達1∶ 1 280以上,有效診斷率為96.29%,研製的SCAg試劑的批內變異4.69%7.66%,批間變異4.12%7.19%,一年內同批試劑分次對定值血清測定OD值變化小于10%,顯示一年內為有效期.通過SCAg技術平檯,進一步研究開髮瞭囊尾蚴CAg、弓形體CAg的檢測方法,初步實驗觀察對囊尾蚴囊液及感染弓形體5 d的小鼠腹水抗原檢測滴度分彆達到1∶ 640及1∶ 1 280. 結論 SCAg標準化平檯技術可大量地、快速地提供標準化的血吸蟲病診斷試劑,對其他寄生蟲CAg檢測顯示有較好的應用前景.
목적연제표준화적혈흡충순배항원(SCAg)매면역법검측시제,건립규모화생산능력.방법통과체외배양급분자사액상색보획취충원성급충란원성SCAg,용면역증강제화림파결내면역법제비고효、특이항SCAg적포착항체,응용반항원항체교방대기술제비고령민도SCAg식별탐침,통과항양화제급오합제비교연구제비은정적저물계통,안의학결정수평학정면역학질량공제표준급삼고,우선원재료질량,규범생산공예,연구제정반응체계적표준화,건립SCAg쾌속연발적기술평태.결과 TCA제취적SCAg측출최저함량위1 ng/ml(10-9g),대실험고감염(1 000±10조미유)가토혼합혈청검측적종점적도가체1∶ 1 280이상,유효진단솔위96.29%,연제적SCAg시제적비내변이4.69%7.66%,비간변이4.12%7.19%,일년내동비시제분차대정치혈청측정OD치변화소우10%,현시일년내위유효기.통과SCAg기술평태,진일보연구개발료낭미유CAg、궁형체CAg적검측방법,초보실험관찰대낭미유낭액급감염궁형체5 d적소서복수항원검측적도분별체도1∶ 640급1∶ 1 280. 결론 SCAg표준화평태기술가대량지、쾌속지제공표준화적혈흡충병진단시제,대기타기생충CAg검측현시유교호적응용전경.