园艺学报
園藝學報
완예학보
ACTA HORTICULTURAE SINICA
2007年
3期
688-694
,共7页
谢吉容%梁国鲁%唐开学%张灏%程在全%黄兴奇
謝吉容%樑國魯%唐開學%張灝%程在全%黃興奇
사길용%량국로%당개학%장호%정재전%황흥기
月季%抑制性消减杂交%花色%花香%突变体%差异表达
月季%抑製性消減雜交%花色%花香%突變體%差異錶達
월계%억제성소감잡교%화색%화향%돌변체%차이표체
为了分析月季花色花香突变机理和揭示花色花香代谢的相关基因,利用抑制性消减杂交技术分离了月季红花无香突变体'往日情怀'(以下简称突变体)与其野生型金黄色浓香品系'金银岛'(以下简称野生型)之间表达差异cDNA片段.分别以突变体作为驱赶子,野生型为检测子,以及以野生型作为驱赶子,突变体为检测子建立了两个差异表达cDNA文库WSSH和JSSH,分别代表在突变体和野生型中特异表达的cDNA;再经文库高密度点阵膜的杂交差示筛选分析,在WSSH库中获得特异表达的27个阳性克隆,在JSSH文库中得到25个阳性克隆.差异表达克隆测序后经BLAST比对分析发现WSSH文库中含有与红花突变体的花青素积累直接相关的CHS、DFR、细胞色素P450加单氧酶、乙二醛酶I、己糖转移因子、MYB1转录因子、S-腺苷蛋氨酸转移酶、ADR等花色相关EST;JSSH文库中含有与野生型花香形成相关的月季甲基间苯二酚O-甲基转移酶、转醛醇酶、Acyl-CoA结合蛋白、钙调素结合蛋白、MYB92转录因子的EST以及导致芽变的Tyl-copia-like逆转座子.
為瞭分析月季花色花香突變機理和揭示花色花香代謝的相關基因,利用抑製性消減雜交技術分離瞭月季紅花無香突變體'往日情懷'(以下簡稱突變體)與其野生型金黃色濃香品繫'金銀島'(以下簡稱野生型)之間錶達差異cDNA片段.分彆以突變體作為驅趕子,野生型為檢測子,以及以野生型作為驅趕子,突變體為檢測子建立瞭兩箇差異錶達cDNA文庫WSSH和JSSH,分彆代錶在突變體和野生型中特異錶達的cDNA;再經文庫高密度點陣膜的雜交差示篩選分析,在WSSH庫中穫得特異錶達的27箇暘性剋隆,在JSSH文庫中得到25箇暘性剋隆.差異錶達剋隆測序後經BLAST比對分析髮現WSSH文庫中含有與紅花突變體的花青素積纍直接相關的CHS、DFR、細胞色素P450加單氧酶、乙二醛酶I、己糖轉移因子、MYB1轉錄因子、S-腺苷蛋氨痠轉移酶、ADR等花色相關EST;JSSH文庫中含有與野生型花香形成相關的月季甲基間苯二酚O-甲基轉移酶、轉醛醇酶、Acyl-CoA結閤蛋白、鈣調素結閤蛋白、MYB92轉錄因子的EST以及導緻芽變的Tyl-copia-like逆轉座子.
위료분석월계화색화향돌변궤리화게시화색화향대사적상관기인,이용억제성소감잡교기술분리료월계홍화무향돌변체'왕일정부'(이하간칭돌변체)여기야생형금황색농향품계'금은도'(이하간칭야생형)지간표체차이cDNA편단.분별이돌변체작위구간자,야생형위검측자,이급이야생형작위구간자,돌변체위검측자건립료량개차이표체cDNA문고WSSH화JSSH,분별대표재돌변체화야생형중특이표체적cDNA;재경문고고밀도점진막적잡교차시사선분석,재WSSH고중획득특이표체적27개양성극륭,재JSSH문고중득도25개양성극륭.차이표체극륭측서후경BLAST비대분석발현WSSH문고중함유여홍화돌변체적화청소적루직접상관적CHS、DFR、세포색소P450가단양매、을이철매I、기당전이인자、MYB1전록인자、S-선감단안산전이매、ADR등화색상관EST;JSSH문고중함유여야생형화향형성상관적월계갑기간분이분O-갑기전이매、전철순매、Acyl-CoA결합단백、개조소결합단백、MYB92전록인자적EST이급도치아변적Tyl-copia-like역전좌자.
