病毒学报
病毒學報
병독학보
CHINESE JOURNAL OF VIROLOGY
2007年
5期
377-383
,共7页
王文玲%黄保英%邓瑶%王秀平%谭文杰%阮力
王文玲%黃保英%鄧瑤%王秀平%譚文傑%阮力
왕문령%황보영%산요%왕수평%담문걸%원력
流感病毒A3型%M2蛋白%重组痘苗病毒%基因表达
流感病毒A3型%M2蛋白%重組痘苗病毒%基因錶達
류감병독A3형%M2단백%중조두묘병독%기인표체
为获得表达甲3型流感病毒(H3N2)M2蛋白的重组天坛株痘苗病毒RVJ1175M2,使用PCR方法扩增流感病毒全长M2基因,将其克隆到天坛株痘苗病毒同源重组质粒pJSC1175中,获得重组质粒pJSC1175M2,通过与痘苗病毒载体同源重组,构建了含流感病毒M2基因的重组痘苗病毒株RVJ1175M2.PCR检测结果证明,流感病毒(H3N2)M2蛋白基因准确插入到天坛株痘苗病毒TK区;Western blot、免疫荧光和流式细胞计数表明重组病毒RVJ1175M2可以有效地表达M2蛋白,表达的M2蛋白有两条带,分别为15kD和13kD,与相关文献报道一致;M2蛋白可有效分布在感染细胞的细胞膜上.这些结果表明重组痘苗病毒株RVJ1175M2可以有效地表达流感病毒M2蛋白,为使用表达M2蛋白的不同类型疫苗进行广谱流感疫苗效果的比较研究奠定了基础.
為穫得錶達甲3型流感病毒(H3N2)M2蛋白的重組天罈株痘苗病毒RVJ1175M2,使用PCR方法擴增流感病毒全長M2基因,將其剋隆到天罈株痘苗病毒同源重組質粒pJSC1175中,穫得重組質粒pJSC1175M2,通過與痘苗病毒載體同源重組,構建瞭含流感病毒M2基因的重組痘苗病毒株RVJ1175M2.PCR檢測結果證明,流感病毒(H3N2)M2蛋白基因準確插入到天罈株痘苗病毒TK區;Western blot、免疫熒光和流式細胞計數錶明重組病毒RVJ1175M2可以有效地錶達M2蛋白,錶達的M2蛋白有兩條帶,分彆為15kD和13kD,與相關文獻報道一緻;M2蛋白可有效分佈在感染細胞的細胞膜上.這些結果錶明重組痘苗病毒株RVJ1175M2可以有效地錶達流感病毒M2蛋白,為使用錶達M2蛋白的不同類型疫苗進行廣譜流感疫苗效果的比較研究奠定瞭基礎.
위획득표체갑3형류감병독(H3N2)M2단백적중조천단주두묘병독RVJ1175M2,사용PCR방법확증류감병독전장M2기인,장기극륭도천단주두묘병독동원중조질립pJSC1175중,획득중조질립pJSC1175M2,통과여두묘병독재체동원중조,구건료함류감병독M2기인적중조두묘병독주RVJ1175M2.PCR검측결과증명,류감병독(H3N2)M2단백기인준학삽입도천단주두묘병독TK구;Western blot、면역형광화류식세포계수표명중조병독RVJ1175M2가이유효지표체M2단백,표체적M2단백유량조대,분별위15kD화13kD,여상관문헌보도일치;M2단백가유효분포재감염세포적세포막상.저사결과표명중조두묘병독주RVJ1175M2가이유효지표체류감병독M2단백,위사용표체M2단백적불동류형역묘진행엄보류감역묘효과적비교연구전정료기출.
